免疫组化(immunohistochemistry,ihc)是基于抗原抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色来对组织内抗原进行定位、定性、定量的一项技术。那么你知道免疫组化实验的分类与应用吗?让我们一起来看看吧!
一、分类
根据抗体标记物的不同一般分为免疫酶标法、免疫荧光法、亲和组织化学法、免疫铁蛋白法、免疫金法、放射免疫自影法。下面介绍两种较为常用的两种技术:
(1)免疫荧光法
免疫荧光法是最早建立的免疫组织学技术。将已知抗体标上荧光素,以此作为探针,检查细胞或组织内的相应抗原。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而对组织中的抗原进行定位或定量。
(2)免疫酶标法
免疫酶标法是继免疫荧光之后发展的应用较为广泛的免疫组化技术。先以酶标记的抗体作用于组织或细胞,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性物质或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对其进行定位,从而对细胞内抗原进行定位或定性研究的一种方法。
二、应用
ihc的原理是通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对其进行定位、定性及定量的研究。人体内很多器官和组织内的组成细胞,由于起源一致,在形态结构上非常相似,很多时候是很难靠形态来区分。在过去没有免疫组化的情况下,识别有很强的主观性,错误难以避免。免疫组化就像细胞的“血型”鉴定,靠它可以明确组织来源。由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,且能将形态研究与功能研究有机结合在一起,所以这门新技术已被广泛应用于生物学和医学研究的许多领域。免疫组化在病理学诊断中的应用主要包括:
(1)确定细胞类型
(2)辨认细胞产物
(3)了解分化程度
(4)鉴定病变性质
(5)探讨肿瘤起源或分化表型
(6)确定肿瘤分期等
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