在使用传统高保真酶进行pcr时,难免会遇到一些棘手的问题。例如保真度不够,扩增得到的片段测序后发现仍有目的碱基发生突变或缺失。扩增的时间也相对漫长,有时扩增5kb的片段也要花费将近2个小时的时间。现小翌推出一款快速高保真pcr以解决您的烦恼!
2× hieff canace® advancefast pcr master mix (with dye) 预混液中含有预先添加的电泳指示剂,pcr产物可直接进行电泳,扩增产物为平末端。该产品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系中只需加入引物和模板即可。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品名称2× hieff canace® advancefast pcr master mix (with dye)
产品特点超高保真:低错配率,高gc易突变序列中碱基错配比231/300000;
扩增速度快:延伸速度快至5 sec/kb;
适用性广:可覆盖20-80%gc含量的基因,耐受小鼠裂解物和20%的血液;
稳定性好:37℃下存放7d,不影响产品性能;
快速简便:只需加入引物和模板即可进行扩增,带有上样染料,可直接电泳;
产品性能展示01保真度高,错配率低
以不同物种基因组为模板,选取6段gc rich、极易发生碱基突变/丢失的片段进行扩增,将各自pcr产物克隆至载体,并对每种序列挑取100个单克隆进行测序以确认碱基序列错配/突变情况。结果显示10164es发生碱基错配/突变的比例优于国内外品牌试剂。
0210kb以内片段扩增延伸时间可达5 sec/kb
使用10164es和t产品均以5 sec/kb的延伸速度从100 ng人基因组模板扩增不同长度片段(0.4-10 kb),延伸时间均要求为5 sec/kb。结果显示,10164es在10kb以内的片段均可以5 sec/kb的延伸速度扩增。marker: yeasen 10510es。
03可扩增不同gc含量的基因片段
使用10164es从人gdna模板中扩增23-76% gc含量片段,延伸时间设置5 sec/kb。结果显示,产品扩增特异性良好,能兼容不同gc含量片段扩增。marker: yeasen 10510es。
04可兼容不同类型的模板
使用10164es从不同样本中扩增不同长度片段,延伸时间设置5-10 sec/kb。结果显示本产品扩增特异性良好,能兼容不同模板的不同片段扩增。
注:1.小鼠gdna 1 kb;2.小鼠gdna 2 kb;3.小鼠gdna 6 kb;4.玉米gdna 1 kb;5.水稻gdna 2 kb-a;6.水稻gdna 2 kb-b;7.人293细胞cdna 1 kb;8.人293细胞cdna 2 kb ;9.人293细胞cdna 3 kb;10.人293细胞cdna 12 kb;11.大肠杆菌菌液8 kb;12.大肠杆菌菌液16 kb;13.水稻gdna 10 kb-a;14.水稻gdna 10 kb-b;15.水稻gdna 10 kb-c;16.水稻gdna 20 kb-a;17.水稻gdna 20 kb-b;18.人血液直扩3 kb。marker: yeasen 10510es
05不同物种模板扩增检出率高
用10164es分别对拟南芥、油菜、马铃薯0.5-10 kb 不同gc含量的片段进行扩增,延伸时间5 sec/kb,结果显示10164es可保证扩增。marker: yeasen 10510es。
用10164es分别对拟南芥、油菜、果蝇、秀丽线虫和斑马鱼中随机序列(序列随机拉取),0.5-10kb覆盖20-80%gc含量的片段进行扩增,延伸时间5 sec/kb,结果显示10164es检出率高。
06稳定性好,37℃可放置7天
使用37℃热加速放置3 d和7 d的10164es分别扩增100 ng人基因组中3 kb和5 kb的dna片段,延伸时间设置5 sec/kb。结果显示产品具有不错的稳定性。marker: yeasen 10510es。
客户试用反馈01动物gdna-120bp-50%gc
客户评价:pcr过程速度快,条带合适,可在琼脂糖电泳中直接上样。进口n品牌的条带偏上,可能是自身的buffer影响,且未添加loading buffer,该产品可替代目前我的实验方案中的高保真酶。
02植物cdna-729bp-45.13%gc
客户评价:与进口t品牌相比,克隆条带更加清晰单一,整个pcr时间也更快,跑胶时不用再额外加染料,非常方便快捷。
03微生物gdna-1158、1953bp-58.8%、52.9%gc
客户评价:与国产v品牌相比,效果相当,个人感觉更佳。
04植物cdna-2000bp-40%gc
客户评价:效果很好,条带清楚。
产品试用通道10163es01-无电泳指示剂
10164es-含电泳指示剂
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产品定位
产品名称
货号
规格
5s/kb,保真保快(无上样染料)
2× hieff canace® advancefast pcr master mix
10163es03
1 ml
5s/kb,保真保快(含上样染料)
2× hieff canace® advancefast pcr master mix (with dye)
10164es03
1 ml
平末端拓扑克隆
hieff clone® zero topo-blunt cloning kit
10909es20
20 t
平末端拓扑克隆,不含多克隆位点
hieff clone® zero topo-blunt simple cloning kit
10910es20
20 t
单片段同源重组克隆
hieff clone® plus one step cloning kit
10911es20/50
20/50 t
单多片段通用同源重组
hieff clone® universal one step cloning kit
10922es20/50
20/50 t
常规克隆感受态
10 chemically competent cell
11801es80
10×100μl
常规克隆感受态
dh5α chemically competent cell
11802es80
10×100 μl
快速克隆感受态
dh5α fast chemically competent cell
11803es80
10×100 μl
常规克隆感受态
bl21(de3) chemically competent cell
11804es80
10×100 μl
快速pcr
2×hieff® ultra-rapid hotstart pcr master mix(with dye)
10157es03/08
1/5×1 ml
常规条带分离
agarose琼脂糖
10208es60
100 g
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