山东金普气相色谱法测定净阴灵中蛇床子素的含量
山东金普气相色谱法测定净阴灵中蛇床子素的含量
摘要：蛇床子提取物的主要有效成分含蒎烯、莰烯，异戊酸龙脑酯（bornyl isovalarate）、异龙脑（isoborneol），甲氧基欧芹酚 （osthole）、蛇床明素（cindimine）、蛇床定（cnidiadin）、异虎耳草素（isopimpinelline）等。
净阴灵是由蛇床子、苦参、黄柏、白鲜皮等药味经科学加工而制成的一种外用制剂,具有清热解毒、除湿止痒之功效。药理实验表明蛇床子中的蛇床子素是其中抗菌止痒、治疗阴道滴虫病的主要有效成分。本文介绍以气相色谱法测定净阴灵中蛇床子素的含量,方法简便,结果准确,可以作为净阴灵内在质量控制指标,以达到保证临床疗效的目的。
1仪器、试剂与样品
日本岛津公司生产的gc-14b型气相色谱仪,cr-6a型数据处理机。
蛇床子素对照品:中国药品生物制品检定所提供,系含量测定用。
样品:江西省上饶制药厂生产,批号960524、940523、960526。
2色谱条件
色谱柱3mm×200cm玻璃柱,担体为80～100目的chromosorbw（awdmcs）,固定相为5%的se-30,柱温250℃,检测器fid,灵敏度0.1,载气为氮气,流速为30ml/min,氢气90kpa,空气50kpa。
3线性关系
精密称取蛇床子素对照品适量,配成0.5mg/ml氯仿溶液,按实验条件分别进样1、2、3、4、5μl,得气相色谱图及相应峰面积,以进样量（μg）对峰面积积分值作图,得回归方程:y=2.63403x×0.000001 0.03673,r=0.9998,线性范围为0.5～2.5mg/ml。
4精密度试验
精密吸取蛇床子素对照品溶液（0.5mg/ml）2μl,按实验条件分别进样5次,蛇床子素对照品峰面积值相对偏差为1.2%,表明精密度良好。
5重现性实验
取本品（批号940524）,按样品测定方法重复测定5次,分别测定蛇床子素的含量,相对标准偏差为1.8%,表明重现性良好。
6回收率试验
采用加样回收法,取已知含量的净阴灵（批号940524）,分别精密添加蛇床子素对照品,按样品含量测定项下方法,测定含量,计算回收率,结果平均回收率为97.1%,相对标准偏差为2.1%。
7样品测定
精密量取净阴灵50ml,置分液漏斗中,用氯仿提取5次,每次50ml,合并氯仿提取液,用无水硫酸钠适量脱水,滤出氯仿液,滤楂用少量氯仿洗涤,合并滤液和洗液,用旋转蒸发器低温蒸干,残渣加氯仿使溶解,定容在2ml量瓶中,作为供试品溶液,进样2μl分析。
8讨论
用5%se-30为固定相的填充柱进行样品中蛇床子素分析,蛇床子素的色谱峰可以达到基线分离,与文献报道的石英毛细管柱的分离效果相当。
山东金普分析仪器有限公司
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色谱柱3mm×200cm玻璃柱,担体为80～100目的chromosorbw（awdmcs）,固定相为5%的se-30,柱温250℃,检测器fid,灵敏度0.1,载气为氮气,流速为30ml/min,氢气90kpa,空气50kpa。
3线性关系
精密称取蛇床子素对照品适量,配成0.5mg/ml氯仿溶液,按实验条件分别进样1、2、3、4、5μl,得气相色谱图及相应峰面积,以进样量（μg）对峰面积积分值作图,得回归方程:y=2.63403x×0.000001 0.03673,r=0.9998,线性范围为0.5～2.5mg/ml。
4精密度试验
精密吸取蛇床子素对照品溶液（0.5mg/ml）2μl,按实验条件分别进样5次,蛇床子素对照品峰面积值相对偏差为1.2%,表明精密度良好。
5重现性实验
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6回收率试验
采用加样回收法,取已知含量的净阴灵（批号940524）,分别精密添加蛇床子素对照品,按样品含量测定项下方法,测定含量,计算回收率,结果平均回收率为97.1%,相对标准偏差为2.1%。
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精密量取净阴灵50ml,置分液漏斗中,用氯仿提取5次,每次50ml,合并氯仿提取液,用无水硫酸钠适量脱水,滤出氯仿液,滤楂用少量氯仿洗涤,合并滤液和洗液,用旋转蒸发器低温蒸干,残渣加氯仿使溶解,定容在2ml量瓶中,作为供试品溶液,进样2μl分析。
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