c18反相液相色谱柱维护与操作步骤

c18反相液相色谱柱的维护
1.c18反相液相色谱柱的平衡
c18反相液相色谱柱由测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡c18反相液相色谱柱。
c18反相液相色谱柱操作步骤:
a.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
b.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水”过渡”即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
2.c18反相液相色谱柱的再生
长期使用的c18反相液相色谱柱,往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对c18反相液相色谱柱进行再生,在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。

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