生物缓冲剂HEPES、PIPES的制备方法及使用注意事项
许多生物学实验都需要使用缓冲液来维持有效的ph，这很重要，因为蛋白质和酶对ph的变化敏感，因此为当前和下游实验选择正确的缓冲液至关重要。在本文中，我将简要讨论hepes和pipes在配置及使用过程中要考虑的一些重要因素，希望能对大家有所帮助。
如何制作hepes及使用注意事项
hepes是两性离子good's缓冲液，在6.8至8.2的ph范围内有效。这使hepes在生理ph值下成为有效的缓冲液。该缓冲液可用于多种生物的细胞培养基中。它也可用作蛋白质研究中的结合缓冲液，用于阳离子交换洗脱实验中，以及在凝胶电泳中用作运行缓冲液。
hepes的制备步骤：
要制备1升1m hepes缓冲溶液，请将238.30 g goldbio hepes溶解 在750 ml dh 2 o中。使用10n氢氧化钠调节至所需的ph。您可以在1m hepes pdf协议中使用一张表。用dh 2 o填充至终体积1l，并通过过滤器或高压釜灭菌。将缓冲液储存在4℃。如果您使用的是hepes钠盐，请改用hepes-na方案。
注意事项：
hepes可溶于水，价格便宜，并且通常具有生物惰性。但是，它确实参与了产生自由基的氧化还原反应，并干扰了dna和限制性内切酶之间的反应，但是由于空间位阻，其干扰程度小于tris。同样重要的是要注意，当使用异质连接蛋白通道时，不应使用hepes，因为它会抑制其功能。如果要进行毒性研究，请选择hepes钠盐而不是游离酸。
如何制作pipes及使用注意事项
pipes是哌秦缓冲液家族的一员，与hepes属于同一家族。它是两性离子good's缓冲液，在6.1至7.5的ph范围内有效。由于ph范围与hepes略有不同，pipes的浓度仅为hepes浓度的一半。该缓冲剂不会与金属络合，因此可用于含金属离子的溶液。它也可以用于色谱分析，电子显微镜固定植物细胞，以及代替草甘膦缓冲液。
pipes的制备步骤：
要制备1升1m pipes游离酸缓冲溶液，请将302.37g pipes游离酸添加到600 ml dh 2 o中。使用10n氢氧化钠调节至所需的ph值。您可以在1m pipes pdf协议中使用一个表。用dh 2 o填充至终体积1l，并使用过滤器或高压灭菌器灭菌。储存在4˚c。如果您使用的是pipes钠盐，请改用1m pipes-na pdf协议。
注意事项：
直到溶液的ph值升高到6.5以上时，pipes的游离酸才容易溶解，但是pipes的钠盐很容易溶解。如果使用的是游离酸形式的缓冲液，请使用氢氧化钠将其转化为钠盐，以提高在较低ph下的溶解度。像hepes一样，pipes不适用于涉及氧化还原反应的实验，因为它会导致自由基的形成。
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hepes的制备步骤：
要制备1升1m hepes缓冲溶液，请将238.30 g goldbio hepes溶解 在750 ml dh 2 o中。使用10n氢氧化钠调节至所需的ph。您可以在1m hepes pdf协议中使用一张表。用dh 2 o填充至终体积1l，并通过过滤器或高压釜灭菌。将缓冲液储存在4℃。如果您使用的是hepes钠盐，请改用hepes-na方案。
注意事项：
hepes可溶于水，价格便宜，并且通常具有生物惰性。但是，它确实参与了产生自由基的氧化还原反应，并干扰了dna和限制性内切酶之间的反应，但是由于空间位阻，其干扰程度小于tris。同样重要的是要注意，当使用异质连接蛋白通道时，不应使用hepes，因为它会抑制其功能。如果要进行毒性研究，请选择hepes钠盐而不是游离酸。
如何制作pipes及使用注意事项
pipes是哌秦缓冲液家族的一员，与hepes属于同一家族。它是两性离子good's缓冲液，在6.1至7.5的ph范围内有效。由于ph范围与hepes略有不同，pipes的浓度仅为hepes浓度的一半。该缓冲剂不会与金属络合，因此可用于含金属离子的溶液。它也可以用于色谱分析，电子显微镜固定植物细胞，以及代替草甘膦缓冲液。
pipes的制备步骤：
要制备1升1m pipes游离酸缓冲溶液，请将302.37g pipes游离酸添加到600 ml dh 2 o中。使用10n氢氧化钠调节至所需的ph值。您可以在1m pipes pdf协议中使用一个表。用dh 2 o填充至终体积1l，并使用过滤器或高压灭菌器灭菌。储存在4˚c。如果您使用的是pipes钠盐，请改用1m pipes-na pdf协议。
注意事项：
直到溶液的ph值升高到6.5以上时，pipes的游离酸才容易溶解，但是pipes的钠盐很容易溶解。如果使用的是游离酸形式的缓冲液，请使用氢氧化钠将其转化为钠盐，以提高在较低ph下的溶解度。像hepes一样，pipes不适用于涉及氧化还原反应的实验，因为它会导致自由基的形成。
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