6孔板转染细胞实验步骤
1.转染前一天接种细胞于6孔板，5×104每孔，第二天转染时细胞汇合度达到60%-70%每孔。
2.转染前半小时将完、全培养基换无血清培养基1.9 ml。
3.a液：rna 100 pmol/dna 2μg （根据核酸类型不同，用量不同）加入50 ul opti-mem无血清培养基，轻轻混匀，室温静置5min。
4.b液：脂质体使用前轻轻混匀，脂质体5ul 加入50 ul opti-mem无血清培养基，轻轻混匀，室温静置5min。
5.b液加入到a液中，用枪轻轻混匀，室温静止20min。
6.将混合液均匀分散慢慢滴加到6孔板细胞中，边滴加边前后左右十字交叉轻轻摇晃。
7.孵箱37℃培养4~6h，然后将无血清培养基换成完、全培养基继续培养。
8.mrna 水平的检测：在转染后24-48h后，用real-time pcr的方法在mrna水平进行检测。
9.蛋白水平的检测：在转染后48-72h后，用western-blot或免疫组化的方法在蛋白水平进行检测。
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2.转染前半小时将完、全培养基换无血清培养基1.9 ml。
3.a液：rna 100 pmol/dna 2μg （根据核酸类型不同，用量不同）加入50 ul opti-mem无血清培养基，轻轻混匀，室温静置5min。
4.b液：脂质体使用前轻轻混匀，脂质体5ul 加入50 ul opti-mem无血清培养基，轻轻混匀，室温静置5min。
5.b液加入到a液中，用枪轻轻混匀，室温静止20min。
6.将混合液均匀分散慢慢滴加到6孔板细胞中，边滴加边前后左右十字交叉轻轻摇晃。
7.孵箱37℃培养4~6h，然后将无血清培养基换成完、全培养基继续培养。
8.mrna 水平的检测：在转染后24-48h后，用real-time pcr的方法在mrna水平进行检测。
9.蛋白水平的检测：在转染后48-72h后，用western-blot或免疫组化的方法在蛋白水平进行检测。
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