液相色谱仪系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件,同时也是易出问题的主要部位。液相色谱技术是近期发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的快速分离、分析技术.它既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,灵活多样,应用范围已超过其它各种分离方法。
液相色谱是目前应用zui多的色谱分析方法,液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。hplc的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。hplc应用非常广泛,几乎遍及定量定性分析的各个领域。
液相色谱仪系统开机或者更换色谱柱时,柱压过高是常出现的问题。色谱柱压过高的原因有两种:
1、色谱柱本身的原因。主要表现在:长期使用受样品污染造成区域堵塞,而引起柱压过高.或者柱子在装填或运输过程中受物理振动造成填料松动,等柱子本身的问题。
2、柱压过高很多常不是色谱柱本身的问题,而是色谱仪器或者液体管路,流动相等外部原因引起的。
当遇到液相色谱仪系统柱压过高时,我们应该怎么解决呢? 首先应该排查出引起柱压过高的原因,而不应武断的把问题的原因怪罪在色谱柱的问题上主要步骤有:
1.拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
2.把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;
3.将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;
4.更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。
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