无外泌体血清的制备步骤及注意事项
无外泌体血清是一种可由多种细胞分泌的直径为30-150nm的膜性小囊泡。经研究后发现，其内含有*的蛋白质与核酸分子，所含成份与其细胞来源密切相关，这也决定了无外泌体血清的功能特异性，如抗原提呈、信号传导或诱导抗肿瘤免疫反应、细胞迁移、细胞分化、细胞间通信、肿瘤转移等。目前，无外泌体血清研究已经成为临床诊断与基础医生的新热点。无外泌体血清制备步骤：
1. 根据需要处理的血清体积选择合适的转子与超离管。
2. 在超净工作台，将普通血清置于超离管中，配平后，进行热封口。
3. 将封口后的超离管放于离心机转子中，并加入相应适配器然后拧紧转头盖。
4. 设置离心程序：4℃，120,000 ×g，离心18小时（也有研究者选择100,000 ×g离心18小时）。
5. 离心结束后，回收上清液，为避免污染，在超净工作台操作。
6. 收集得到无外泌体血清，并储存于-20℃中备用。
注意事项请注意了：
1：离心后，血清外泌体会富集在管底和管壁；
2：吸取血清时，只吸取澄清部分的血清，并且远离上图中标记的区域；
3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：动作慢，动作轻）
4：其余的浑浊血清留作正常细胞的的营养物添加使用，避免浪费。
5：如果觉得纯度不够，再把离心后收集的血清做二次超速离心。
6：针对超速离心后的血清，必须进行粒径检测（离心前样品和离心后样品），该数据可以放到文章补充材料中，用来证明无血清外泌体制备成功。
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2：吸取血清时，只吸取澄清部分的血清，并且远离上图中标记的区域；
3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：动作慢，动作轻）
4：其余的浑浊血清留作正常细胞的的营养物添加使用，避免浪费。
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