在液相色谱分析中,正相色谱以己烷作为流动相主体,二氯甲烷、氯仿作为改性剂;反相色谱以水作为流动相主体,以甲醇、乙腈、四氢呋喃作为改性剂。通常使用分析纯、优级纯试剂,可以满足液相色谱分析的要求,但为了防止微粒杂质堵塞流路或柱入片,流动相都需要微孔玻璃漏斗过滤,或用0.45µm的微孔滤膜过滤后再使用。
正相色谱中使用己烷、二氯甲烷、氯仿中经常含微量的水分,其会改变液固色谱柱的分离性能,使用前应用球形分子筛柱脱去微量水分。
反相色谱中使用的甲醇、乙腈、四氢呋喃不必脱除微量水,但此时作为流动相主体的水,应使用高纯水或二次蒸馏水。甲醇、乙腈、四氢呋喃使用前经硅胶柱净化,除去具有紫外吸收的杂质,特别是乙腈纯度低时会对uvd产生严重干扰。四氢呋喃中含抗氧剂,且长期放置会产生易爆的过氧化物,使用前应用10%ki溶液检验有无过氧化物,使用新蒸馏出的四氢呋喃。
此外卤代烃中的杂质,如氯仿中可能会产生光气,二氯甲烷中含有,都会对分离产生不良影响。
用作流动相的各种溶剂经纯化处理后,在储液罐中还必须经过超声或真空脱气,才能使用。
关键词:微孔滤膜 色谱柱
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