土壤酸性磷酸酶(soil acid phosphatase s-acp)活性
测定试剂盒说明书
for research use only
仅供研究用
货号:qys-235098
分光光度法 50 管/48 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定
测定意义
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 ph 显著影响,根据zui适 ph 范围,通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
测定原理
酸性环境中 s-acp 催化磷酸苯二钠水解生成*和*,通过测定酚的生成 即
算出 s-acp 活性。
自备仪器和用品
见分光光度光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。
试剂组成和配制
n
粗酶液提取:
称取风化混匀土壤约 0.1g,加入 50µl 甲苯(自备),轻摇 15min;加 0.4ml 试剂一并且摇匀后,置于 37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应 24h;到时后迅速加入 1ml 试剂二充分混匀, 以终止酶催化的反应。8000g,25℃离心 10min,取上清液置于冰上待测。
测定步骤
1.分光光度计预热 30 min,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。
2.空白管:取1ml 玻璃比色皿,加入 50 µl 蒸馏水,100 µl 试剂三,20 µl 试剂四,充分混匀, 显色后再加蒸馏水 830 µl,混匀后 25℃静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 a空白管。
3.标准管:取1ml 玻璃比色皿,加入 50 µl 标准液,100 µl 试剂三,20 µl 试剂四,充分混匀, 显色后再加蒸馏水 830 µl,混匀后 25℃静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 a标准管
4.测定管:取1ml 玻璃比色皿,加入 50 µl上清液,100 µl 试剂三,20 µl 试剂四,充分混匀, 显色后再加蒸馏水 830 µl,混匀后 25℃静置 30 min,于660 nm 测定吸光度,记为 a测定管。
注意 空白管和标准管只需测定一次
s-acp 活性计算公式
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