【新品发布】MRD标准品_40+位点panel标准品
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mrd是指治疗后体内残留的肿瘤细胞或者标志物，通常的翻译有3种，微小残留病灶（minimal residual disease）、可检测残留病灶（measurable residual disease）、分子残留病灶（molecular residual disease）。
研发现状
现有的针对ctdna的mrd检测主要有2条技术路线：tumor-agnostic -assays(肿瘤未知分析)和tumor-informed assays(肿瘤知情/先验分析)，其中tumor-agnostic -assays仅对血浆检测，利用的是固定的panel（一般为驱动基因和靶向药物基因，也会多组学方法）和分析方法对ctdna做检测，做分析，代表产品guardant health公司的guardant reveal；tumor-informed assays需要对原发肿瘤组织进行测序（一般为wes），来鉴定患者的特异基因组变异图谱，然后再定制个性化的panel，针对ctdna做检测，也就是说需要对组织和血浆都做检测，代表产品为natera公司的signatera。国内ivd公司对mrd的检测，截至发稿前，小编遇到的tumor-informed assays为多。
fig 1. 针对mrd的检测两种检测技术路线
mrd技术难度很大的一个方面是对超低频突变的检测能力和稳定性，以非小细胞肺癌为例，在早期nsclc患者血浆中位cfdna的浓度为7.69 ng/ml，换算在10 ml血浆(20ml全血)中含有大概20,000个单倍体基因组（3.3pg），考虑到cfdna建库时的损耗以及至少存在2条相同的变异基因序列，10 ml血浆中ctdna检测到的极限分子信号为0.02%水平，另外, 从tracerx研究数据推算, 在1 cm3体积的肿瘤情况下, 10 ml血浆中大概含有2条肿瘤来源dna分子。因此, 在nsclc中进行mrd检测时, 该检测方法必须可稳定检测出丰度≥ 0.02%的ctdna。这里有个重要的技术策略，就是sample level的策略，对于site level的0.02%甚至更低，可以通过samples level来提高灵敏度。
mrd标准品
针对ctdna检测的mrd诊断ivd的开发，少不了的是性能评价，自然也是少不了标准品的开发，科佰生物是一家专注ivd研发中诊断阳性参考品、检测限参考品、精密度参考品的研发生产型企业，针对ctdna的超低频标准品的开发，我们推出我们mrd的标准品：package-reftm mrd cocktail reference standard
table 1. package-reftm mrd cocktail reference standard的全套产品信息
这是一款多基因多位点的panel标准品，基因和位点覆盖范围广，突变类型丰富，十分适合作为ldt和ivd检测的参考品、质控品。
科佰生物在其中挑选了40+位点（病理学分级意义的位点）开发ddpcr，采取fig 2/fig 3的策略对低频、超低频的位点进行定标：
定标方案
定标
1
针对0.5%的频率采用优化后的ddpcr对每个位点做精确的定标，平均单孔拷贝数大于6000，确保真实阳性，区分lob的干扰；
2
针对0.05%的频率，使用样本中自带的高频位点（比如braf p.v600e的5%），通过使用ddpcr检验高频位点的频率变化（比如braf p.v600e稀释10倍是0.5%），来判断稀释倍数的准确度，进而间接验证对应位点的频率变化；
3
针对0.005%的频率，使用样本中自带的高频位点（比如braf p.v600e的5%），通过使用ddpcr检验高频位点的频率变化（比如braf p.v600e稀释100倍是0.05%），来判断稀释的准确度，进而间接验证对应位点的频率变化（针对0.05%的braf p.v600e采用优化的ddpcr多次检测，要求如下：位点lob控制在5拷贝以下，有效拷贝数大于12000，多次检测求平均值）；
4
针对0%的频率，使用与0.5%一致的ddpcr条件，在保证大于6000拷贝的前提下，阳性低于lob的值；
fig 2. serial dilution assay for mrd reference standard
fig 3. 如何对低频、超低频的频率进行定标？科佰生物采取了1和4的方法开展定标。
30+基因 40+位点
科佰生物针对package-reftm mrd cocktail reference standard的产品，选择了30+基因40+位点（部分基因位点ddpcr数据正在验证中），全部开发ddpcr检测体系，精确定标0.5%的频率波动，选择了6个基因7个位点作为0.05%的稀释倍数验证，选择2个基因2个位点作为0.005%的稀释倍数验证。
table 2. mrd标准品-0.5%经过ddpcr精确定标的基因，黑色为0.5%的验证基因，红色是用于稀释倍数验证的基因。
package-reftm mrd cocktail reference standard包含多种突变类型，有snv/insertion/deletion/fusion，在突变类型上，有missense/nonsense/deletion - in frame/deletion - frameshift/insertion - in frame/insertion - frameshift/translocation/spice-site等等，在临床的病理分级上基本都是pathogenic/likely pathogenic，具体位点明细如下：
table 3. package-reftm mrd cocktail reference standard-0.5%的部分位点展示，黑色为目标位点，红色为用于稀释倍数验证的位点。
table 4. package-reftm mrd cocktail reference standard的稀释倍数验证数据展示。科佰生物内部还在进一步开发更多的位点，产品还会进一步升级。
mrd标准品
试用装申请
为感谢大家对科佰生物的信任与支持，特推出“新品试用”活动，名额有限，先到先得。
翻板式进料阀JQ641FM翻板式钟罩阀的工作原理
活性氧DCFH-DA，在流式细胞仪中的检测
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使用台式X荧光光谱仪科学检测水泥等多样品
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适用于分散机的介质的特性
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可程式恒温恒湿试验箱材质
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冻干虾皮需要经过哪些工序
那些原因导致振动筛筛网破裂得太快呢？
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研发现状
现有的针对ctdna的mrd检测主要有2条技术路线：tumor-agnostic -assays(肿瘤未知分析)和tumor-informed assays(肿瘤知情/先验分析)，其中tumor-agnostic -assays仅对血浆检测，利用的是固定的panel（一般为驱动基因和靶向药物基因，也会多组学方法）和分析方法对ctdna做检测，做分析，代表产品guardant health公司的guardant reveal；tumor-informed assays需要对原发肿瘤组织进行测序（一般为wes），来鉴定患者的特异基因组变异图谱，然后再定制个性化的panel，针对ctdna做检测，也就是说需要对组织和血浆都做检测，代表产品为natera公司的signatera。国内ivd公司对mrd的检测，截至发稿前，小编遇到的tumor-informed assays为多。
fig 1. 针对mrd的检测两种检测技术路线
mrd技术难度很大的一个方面是对超低频突变的检测能力和稳定性，以非小细胞肺癌为例，在早期nsclc患者血浆中位cfdna的浓度为7.69 ng/ml，换算在10 ml血浆(20ml全血)中含有大概20,000个单倍体基因组（3.3pg），考虑到cfdna建库时的损耗以及至少存在2条相同的变异基因序列，10 ml血浆中ctdna检测到的极限分子信号为0.02%水平，另外, 从tracerx研究数据推算, 在1 cm3体积的肿瘤情况下, 10 ml血浆中大概含有2条肿瘤来源dna分子。因此, 在nsclc中进行mrd检测时, 该检测方法必须可稳定检测出丰度≥ 0.02%的ctdna。这里有个重要的技术策略，就是sample level的策略，对于site level的0.02%甚至更低，可以通过samples level来提高灵敏度。
mrd标准品
针对ctdna检测的mrd诊断ivd的开发，少不了的是性能评价，自然也是少不了标准品的开发，科佰生物是一家专注ivd研发中诊断阳性参考品、检测限参考品、精密度参考品的研发生产型企业，针对ctdna的超低频标准品的开发，我们推出我们mrd的标准品：package-reftm mrd cocktail reference standard
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科佰生物在其中挑选了40+位点（病理学分级意义的位点）开发ddpcr，采取fig 2/fig 3的策略对低频、超低频的位点进行定标：
定标方案
定标
1
针对0.5%的频率采用优化后的ddpcr对每个位点做精确的定标，平均单孔拷贝数大于6000，确保真实阳性，区分lob的干扰；
2
针对0.05%的频率，使用样本中自带的高频位点（比如braf p.v600e的5%），通过使用ddpcr检验高频位点的频率变化（比如braf p.v600e稀释10倍是0.5%），来判断稀释倍数的准确度，进而间接验证对应位点的频率变化；
3
针对0.005%的频率，使用样本中自带的高频位点（比如braf p.v600e的5%），通过使用ddpcr检验高频位点的频率变化（比如braf p.v600e稀释100倍是0.05%），来判断稀释的准确度，进而间接验证对应位点的频率变化（针对0.05%的braf p.v600e采用优化的ddpcr多次检测，要求如下：位点lob控制在5拷贝以下，有效拷贝数大于12000，多次检测求平均值）；
4
针对0%的频率，使用与0.5%一致的ddpcr条件，在保证大于6000拷贝的前提下，阳性低于lob的值；
fig 2. serial dilution assay for mrd reference standard
fig 3. 如何对低频、超低频的频率进行定标？科佰生物采取了1和4的方法开展定标。
30+基因 40+位点
科佰生物针对package-reftm mrd cocktail reference standard的产品，选择了30+基因40+位点（部分基因位点ddpcr数据正在验证中），全部开发ddpcr检测体系，精确定标0.5%的频率波动，选择了6个基因7个位点作为0.05%的稀释倍数验证，选择2个基因2个位点作为0.005%的稀释倍数验证。
table 2. mrd标准品-0.5%经过ddpcr精确定标的基因，黑色为0.5%的验证基因，红色是用于稀释倍数验证的基因。
package-reftm mrd cocktail reference standard包含多种突变类型，有snv/insertion/deletion/fusion，在突变类型上，有missense/nonsense/deletion - in frame/deletion - frameshift/insertion - in frame/insertion - frameshift/translocation/spice-site等等，在临床的病理分级上基本都是pathogenic/likely pathogenic，具体位点明细如下：
table 3. package-reftm mrd cocktail reference standard-0.5%的部分位点展示，黑色为目标位点，红色为用于稀释倍数验证的位点。
table 4. package-reftm mrd cocktail reference standard的稀释倍数验证数据展示。科佰生物内部还在进一步开发更多的位点，产品还会进一步升级。
mrd标准品
试用装申请
为感谢大家对科佰生物的信任与支持，特推出“新品试用”活动，名额有限，先到先得。
翻板式进料阀JQ641FM翻板式钟罩阀的工作原理
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辽宁混凝土色差调整产品
使用台式X荧光光谱仪科学检测水泥等多样品
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无人值守的农业气象站在小麦种植中的作用
HXF4带接管呼吸阀HX4的制造标准及要求
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适用于分散机的介质的特性
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