分析苯基尿素类杀虫剂的实验方法
色谱流动相的制备：
1m甲酸铵溶液：称取63g甲酸铵，溶于1l hplc级的水中。
流动相a：在1l水 (hplc级) 中加入5ml 1m 甲酸铵溶液。
流动相b：在1l甲醇 (hplc级) 中加入5ml 1m 甲酸铵溶液。
样品制备（水果与蔬菜基质）
基于anastassiadies等人提出的方法[1]：
1. 称量10g切碎的样品；
2. 加入100µl内标溶液(d5 - atrazine 1µg/ml)；
3. 加入10ml乙腈，剧烈振摇；
4. 加入4g无水mgso4和1g的nacl；
5. 马上涡旋混合，以防止mgso4共聚物的生成；
6. 振摇30s后，4300r/min离心5min；
7. 取出1ml初提液，转移至含有150mg无水mgso4的离心管中；
8. 混合，5200r/min离心1min；
9. 取出500µl上清液，用水将稀释到1ml，得到提取液浓度约为0.5g/ml
基于klein和alder等人提出的方法[2, 3]：
1. 在5g或10g样品中，加入水到10ml；
2. 加20ml甲醇，使用ultraturrax 组织匀浆机匀浆2min；
3. 有时需要过滤或离心；
4. 加入nacl溶液 (100ml水中含20g nacl)，每6ml加入nacl溶液2ml；
5. 用5ml样品溶液浸泡 chemelut 柱；
6. 5min后，用16ml二氯甲烷洗脱；
7. 40℃挥发至干；
8. 用甲醇与水的混合溶液1.25ml (甲醇0.25ml，水1ml) 重新溶解；
9. 用0.45µm滤膜过滤。
基于lehotay et al.[4]提出的方法：
1. 使用molinex 混合器或类似设备匀质水果或蔬菜样品；
2. 加入乙腈， (15.0 ± 0.05) g匀质的样品加乙腈15ml，超声提取2min后，混旋5min；
3. 加入6g无水mgso4和1.5g nacl的混合物，剧烈振摇1min；
4. 3000r/min离心5min；
5. 取5ml上层溶液，加入1.8g 无水mgso4和0.3g bondesil c8 吸附剂；
6. 振摇20s；
7. 使用eppendorf 5301型浓缩仪，或类似设备挥发至干；
8. 用乙腈/水＝1/9的溶液1ml重新溶解样品；
9. 12000r/min 高速离心2min；
10. 上清液转入自动进样器的进样瓶中备用。
色谱分离条件
agilent 1100 系统：g1312a二元泵系统、g1367a型自动进样器、柱温箱。
色谱柱：phenomenex synergi fusion-rp反相柱，50mm×2mm，4µm，内孔 80å。
流动相：a相—水+5mm甲酸铵；b相—甲醇+5mm甲酸铵。
梯度设置：
ms/ms 检测
api 3200™或3200 qtrap® lc-ms/ms液质分析系统。turboionspray® 离子源，负离子模式，mrm扫描方式。
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流动相a：在1l水 (hplc级) 中加入5ml 1m 甲酸铵溶液。
流动相b：在1l甲醇 (hplc级) 中加入5ml 1m 甲酸铵溶液。
样品制备（水果与蔬菜基质）
基于anastassiadies等人提出的方法[1]：
1. 称量10g切碎的样品；
2. 加入100µl内标溶液(d5 - atrazine 1µg/ml)；
3. 加入10ml乙腈，剧烈振摇；
4. 加入4g无水mgso4和1g的nacl；
5. 马上涡旋混合，以防止mgso4共聚物的生成；
6. 振摇30s后，4300r/min离心5min；
7. 取出1ml初提液，转移至含有150mg无水mgso4的离心管中；
8. 混合，5200r/min离心1min；
9. 取出500µl上清液，用水将稀释到1ml，得到提取液浓度约为0.5g/ml
基于klein和alder等人提出的方法[2, 3]：
1. 在5g或10g样品中，加入水到10ml；
2. 加20ml甲醇，使用ultraturrax 组织匀浆机匀浆2min；
3. 有时需要过滤或离心；
4. 加入nacl溶液 (100ml水中含20g nacl)，每6ml加入nacl溶液2ml；
5. 用5ml样品溶液浸泡 chemelut 柱；
6. 5min后，用16ml二氯甲烷洗脱；
7. 40℃挥发至干；
8. 用甲醇与水的混合溶液1.25ml (甲醇0.25ml，水1ml) 重新溶解；
9. 用0.45µm滤膜过滤。
基于lehotay et al.[4]提出的方法：
1. 使用molinex 混合器或类似设备匀质水果或蔬菜样品；
2. 加入乙腈， (15.0 ± 0.05) g匀质的样品加乙腈15ml，超声提取2min后，混旋5min；
3. 加入6g无水mgso4和1.5g nacl的混合物，剧烈振摇1min；
4. 3000r/min离心5min；
5. 取5ml上层溶液，加入1.8g 无水mgso4和0.3g bondesil c8 吸附剂；
6. 振摇20s；
7. 使用eppendorf 5301型浓缩仪，或类似设备挥发至干；
8. 用乙腈/水＝1/9的溶液1ml重新溶解样品；
9. 12000r/min 高速离心2min；
10. 上清液转入自动进样器的进样瓶中备用。
色谱分离条件
agilent 1100 系统：g1312a二元泵系统、g1367a型自动进样器、柱温箱。
色谱柱：phenomenex synergi fusion-rp反相柱，50mm×2mm，4µm，内孔 80å。
流动相：a相—水+5mm甲酸铵；b相—甲醇+5mm甲酸铵。
梯度设置：
ms/ms 检测
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