百萤 钙蓝素AM，细胞渗透型钙黄绿素
钙蓝素,am是美国aat bioquest生产的细胞渗透性钙黄绿素，它是钙黄绿素的细胞渗透型。进入活细胞后，弱荧光钙黄绿素am被水解成钙黄绿素，其激发/发射大值与dapi，hoechst和amca相似。与典型的绿色和红色荧光团（如fitc，tmr和德克萨斯红）的这种特殊光谱分离为多路复用实验提供了额外的选择。因为钙黄绿素am本身是荧光的，所以可能需要适当的过滤器组和额外的洗涤步骤以使背景荧光小化。我们的钙测定缓冲液可用于有效洗涤细胞外钙黄绿素。
1.百萤 钙蓝素am 参数：
e x(nm) 354
e m(nm) 441
分 子 量 465.41
溶 剂 dmso
存储条件 在零下15度以下保存，避免光照
c a s 168482-84-6
2.百萤 钙蓝素am适用仪器
流式细胞仪
ex: 350nm or 405nm
em: 450/40 nm
通道: pacific blue通道
荧光显微镜
ex: dapi滤波片组
em: dapi滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
荧光酶标仪
ex: 360nm
em: 450 nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
3.百萤 钙蓝素am实验方案
操作步骤
（1）准备hhbs缓冲液，10％pluronic®f-127溶液和25 mm probenecid溶液。
（2）在高质量无水dmso中制备2 mm至5 mm calcein blue，am * cas 168482-84-6 *储备液。
（2.1）卡介素蓝量，am * cas 168482-84-6 *使用量：1毫克
（2.2）所需浓度：2 mm
（2.3）在合适的容器中，将1mg钙黄绿素，am * cas 168482-84-6 *与1074.32μl无水dmso混合。
（3）用含有10μm钙黄绿素的hhbs制备2x工作溶液，am * cas 168482-84-6 * 4，0.08％pluronic®f-127和2 mm*磺舒。
（3.1）calcein blue的终孔内浓度，am * cas 168482-84-6 *：5μm
（3.2）pluronic®f-127的终孔内浓度：0.04％
（3.3）终孔内浓度的*磺舒：1mm
（3.4）在合适的容器中混合16μl钙黄绿素，am * cas 168482-84-6 *，25.6μl10％pluronic®f-127和256μl25mm probenecid。然后，添加hhbs或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 ml。
注意：对于大多数细胞系，我们建议终浓度为calcein blue，am * cas 168482-84-6 *为4至5μm。
注意：推荐的pluronic f-127井浓度终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的终浓度为1至2.5 mm的probenecid。
（4）将100μl染料工作溶液加入已经含有100μl培养基的所需孔中。
（4.1）此步骤将染料工作溶液从2x稀释至1x，并将每种组分的终浓度调整为以下：5μm钙黄绿素，am * cas 168482-84-6 *，0.04％pluronic®f-127,1 mm*磺舒。
（5）孵育染料
（5.1）将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
（5.2）将染料加载板在室温下孵育30分钟。
（6）用1.0 mm probenecid准备hhbs缓冲液（或您选择的缓冲液）。
在合适的容器中加入160μl的25mm*磺舒。 接下来，添加hhbs或您选择的缓冲液，直到体积为4 ml。
（7）用hhbs缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mm probenecid。
（7.1）首先，从所需孔中除去200μl染料工作溶液和培养基。
（7.2）在相同的孔中加入200μl含有1.0mm*磺舒的hhbs（或您选择的缓冲液）。
（8）运行实验
（8.1）为您的样品添加所需的处理。
（8.2）以ex / em = 360/445 nm运行实验。
关键词：流式细胞仪 荧光显微镜 荧光酶标仪 细胞培养箱
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1.百萤 钙蓝素am 参数：
e x(nm) 354
e m(nm) 441
分 子 量 465.41
溶 剂 dmso
存储条件 在零下15度以下保存，避免光照
c a s 168482-84-6
2.百萤 钙蓝素am适用仪器
流式细胞仪
ex: 350nm or 405nm
em: 450/40 nm
通道: pacific blue通道
荧光显微镜
ex: dapi滤波片组
em: dapi滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
荧光酶标仪
ex: 360nm
em: 450 nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色透明底板
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3.百萤 钙蓝素am实验方案
操作步骤
（1）准备hhbs缓冲液，10％pluronic®f-127溶液和25 mm probenecid溶液。
（2）在高质量无水dmso中制备2 mm至5 mm calcein blue，am * cas 168482-84-6 *储备液。
（2.1）卡介素蓝量，am * cas 168482-84-6 *使用量：1毫克
（2.2）所需浓度：2 mm
（2.3）在合适的容器中，将1mg钙黄绿素，am * cas 168482-84-6 *与1074.32μl无水dmso混合。
（3）用含有10μm钙黄绿素的hhbs制备2x工作溶液，am * cas 168482-84-6 * 4，0.08％pluronic®f-127和2 mm*磺舒。
（3.1）calcein blue的终孔内浓度，am * cas 168482-84-6 *：5μm
（3.2）pluronic®f-127的终孔内浓度：0.04％
（3.3）终孔内浓度的*磺舒：1mm
（3.4）在合适的容器中混合16μl钙黄绿素，am * cas 168482-84-6 *，25.6μl10％pluronic®f-127和256μl25mm probenecid。然后，添加hhbs或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 ml。
注意：对于大多数细胞系，我们建议终浓度为calcein blue，am * cas 168482-84-6 *为4至5μm。
注意：推荐的pluronic f-127井浓度终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的终浓度为1至2.5 mm的probenecid。
（4）将100μl染料工作溶液加入已经含有100μl培养基的所需孔中。
（4.1）此步骤将染料工作溶液从2x稀释至1x，并将每种组分的终浓度调整为以下：5μm钙黄绿素，am * cas 168482-84-6 *，0.04％pluronic®f-127,1 mm*磺舒。
（5）孵育染料
（5.1）将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
（5.2）将染料加载板在室温下孵育30分钟。
（6）用1.0 mm probenecid准备hhbs缓冲液（或您选择的缓冲液）。
在合适的容器中加入160μl的25mm*磺舒。 接下来，添加hhbs或您选择的缓冲液，直到体积为4 ml。
（7）用hhbs缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mm probenecid。
（7.1）首先，从所需孔中除去200μl染料工作溶液和培养基。
（7.2）在相同的孔中加入200μl含有1.0mm*磺舒的hhbs（或您选择的缓冲液）。
（8）运行实验
（8.1）为您的样品添加所需的处理。
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