非常让人着迷的实验,其成功关键之一是选择可信的实验试剂。
我司细胞近3000种,来源于美国atcc,细胞都是经过严格质量控制,在中国大陆努力搭建正牌细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁。为您提供人胃腺癌细胞(绿色荧光)外,还有更多相关实验产品,标准品,细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。
人胃腺癌细胞(绿色荧光)的产品介绍
人胃腺癌细胞(绿色荧光)由我司*销售人胃腺癌细胞(绿色荧光)。
人胃腺癌细胞(绿色荧光)细胞株
q1. 人胃腺癌细胞(绿色荧光)液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的ph值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
q2.人胃腺癌细胞(绿色荧光) 液体培养基中*的作用,及使用方法。
几乎所有的细胞对*有较高的要求,细胞需要*合成蛋白质,在缺少*时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的*。*在溶液中很不稳定,应置-20 ?c冰冻保存,用前加入培养基中。加有*的液体培养基4 ?c 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的*。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的*溶液(1ml/支)。每支1ml的*加到99ml*培养基中,其终浓度为2mm/ml培养基。包装为粉红色,-24?c保存。
q3.细胞计数及存活测试
1、原理:
(1)计算细胞数目可用血球计数盘或是coultercounter粒子计数器自动计数。
(2)血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber中细刻9个1mm2大正方形,其中4个角落之正方形再细刻16个小格,深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后,每个大正方形之体积为1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用时,计数每个大正方形内之细胞数目,乘以稀释倍数,再乘以104,即为每ml中之细胞数目。
(3)存活测试之步骤为dyeexclusion,利用染料会渗入死细胞中而呈色,而活细胞因细胞膜完整,染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue染料,如果细胞不易吸收trypan blue,则用红色之erythrosin bluish。计算细胞活率:活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%。计数应在台盼兰染色后数分钟内完成,随时间延长,部分活细胞也开始摄取染料;因为台盼兰对蛋白质有很强的亲和力,用不含血清的稀释液,可以使染色计数更为准确。
q4.细胞特性
在细胞培养之前,我们要了解一下你所要养细胞的基本特性,这点可以从细胞的产品说明书或者从atcc细胞库查询。除此之外我们还要知道每管细胞的数量,建议分裂或传代的比例,和已知细胞的传代代次等信息。
q5.准备培养基
复苏细胞时需要准备合适的培养基,血清和细胞生长所需的添加剂。大部分培养细胞所用的培养体系,可以在订购细胞系时获得。
虽然大多数细胞系可以在不止一种培养基中生长,但是当培养基改变时,细胞的性质也会变化。因此,使用细胞库*的培养基来培养细胞会获得的效果。
q6.开启冻存管
1.准备一个培养瓶,加入适宜细胞培养的培养基,液体体积按照说明书的*配置,并平衡培养基的温度和ph(co2)。
2.在37℃水浴中或细胞的正常生长温度下将冻存管轻轻摇动。解冻要快,约2分钟或直到冰晶融化即可。
3.从水浴中取出冻存管并用浸泡或喷洒70%乙醇的方式来消毒。进一步的操作均需在无菌操作台中严格无菌条件下进行。
4.拧开冻存管的管帽并将内容物转移到一个含有9 ml*培养基的无菌离心管中。通过温和离心(125×g 10 min)除去冷冻保护剂(dmso)。弃去上清,并用1或2 ml*培养基重悬细胞。将这些细胞悬液转移到含有*培养基的培养瓶中并轻轻摇动以*混匀。
5.培养24小时后检查细胞状态并在需要时进行传代。
q7. 人胃腺癌细胞(绿色荧光) 培养用液ph对细胞生长的影响
由于,大多数细胞适宜ph为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对ph的要求也不*相同,原代培养细胞一般对ph变动耐受差,无限细胞系耐受力强。
但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的ph稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的ph还会向上浮动0.2左右。
人胃腺癌细胞(绿色荧光)质量可靠,售后有保障(编辑:tanxi)
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