BUNSEN快讯：ELISA试剂盒实验中的封闭液等常用试剂的配制
bunsen快讯：elisa试剂盒实验中的封闭液等常用试剂的配制
elisa试剂盒实验中的封闭液小知识
elisa的试剂盒说明上写封闭液用蔗糖溶液，一般是用bsa或酪蛋白的蛋白分子封闭空白位点，蔗糖封闭的原理：
1.elisa实验中，蔗糖本身没有封闭作用;
2.封闭液一般是bsa、酪蛋白等或者是tween等。
3.加蔗糖的主要目的是保护elisa板子吸附(包被)的蛋白，起到“保护剂”的作用。
4.蔗糖溶液一般在elisa板子经过bsa封闭后加，当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证。但多数选择前者。
封闭剂还可用5%的脱脂乳(市售即可)，0.4%的明胶，但是实验表明前者比较好，后者不容易洗干净未结合上的明胶。封闭剂的原理就是与酶联板上未结合抗原或抗体的微孔中用封闭剂封闭上，结合抗体或抗原的时候就不会产生非特异结合了，不会影响实验的准确度。
elisa实验中缓冲溶液等试剂的配置
elisa实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，elisa试剂以及各种溶液如何配置?zui近刚做了下elisa实验，把各种elisa配置方法汇总如下：
1.elisa实验包被缓冲液(ph9.6 0.05m碳酸盐缓冲液):
nahco3 1.59克
nahco3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
2.elisa实验洗涤缓冲液(ph7.4 pbs)：0.15m
kh2po4 0.2克
na2hpo4·12h2o 2.9克
nacl 8.0克
kcl 0.2克
tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸馏水至1000ml
3.elisa实验稀释液：
牛血清白蛋白(bsa) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。
4.elisa实验终止液(2m h2so4)：
蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
5. elisa底物缓冲液(ph5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2m na2hpo4(28.4克/l) 25.7ml
0.1m 柠檬酸(19.2克/l) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
6.elisa实验tmb(四甲基联苯胺)使用液:
tmb(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml
底物缓冲液(ph5.5) 10ml
0.75%h2o2 32μl
7.elisa实验abts使用液:
abts 0.5mg
底物缓冲液(ph5.5) 1ml
3%h2o2 2μl
8.elisa实验封闭液：
牛血清白蛋白(bsa) 5克
加洗涤缓冲液至100ml。
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。
elisa试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。
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4.蔗糖溶液一般在elisa板子经过bsa封闭后加，当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证。但多数选择前者。
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kcl 0.2克
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3.elisa实验稀释液：
牛血清白蛋白(bsa) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。
4.elisa实验终止液(2m h2so4)：
蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
5. elisa底物缓冲液(ph5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2m na2hpo4(28.4克/l) 25.7ml
0.1m 柠檬酸(19.2克/l) 24.3ml
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底物缓冲液(ph5.5) 10ml
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底物缓冲液(ph5.5) 1ml
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牛血清白蛋白(bsa) 5克
加洗涤缓冲液至100ml。
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