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常见的RNA提取方法
不同组织rna提取原理是将细胞裂解,释放出 rna,并通过不同方式去除蛋白,dna 等杂质,最终获得高纯度 rna 产物的过程。那么你知道常见的rna提取方法有什么吗?让我们一起来看看吧!一、酚氯仿抽提(有机试剂抽提)
原理:将被裂解的生物样本,混匀离心分相以后,rna在上层水相,dna,蛋白质在中间层,下层有机相。收集水相加入乙醇或异丙醇可沉淀rna,漂洗后得到rna。
优点:得率高、可提取到含mirna和其他小rna在内的总rna。
缺点:用到苯酚、氯仿等有毒试剂。
二、硅胶柱法抽提
原理:硅基质材料在一定的高盐缓冲系统下高效、专一地吸附核酸。(高盐低ph吸附核酸,低盐高ph释放核酸。
优点:操作简单、安全无毒
缺点:需配合高速离心机使用;提取的总rna不含小于200nt的小rna。
三、磁珠法抽提
原理:纳米微球磁珠材料表面涂上一层二氧化硅,使磁珠获得吸附能力。
优点:磁场中快速分离,无需离心,可实现自动化操作。
缺点:成本较高;提取的rna可能残存磁珠。
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