各种Vero细胞培养液的成分比较
近10年来，低血清和无血清vero细胞培养基的开发受到了重视，一些研究机构发布了自己的研究结果。其中，无血清细胞培养基开发的难度大，因为无血清培养系统中的细胞对于的ph值、温度、渗透压、机械力和酶处理更为敏感。换用无血清培养基时，每次传代常需采用较高的密度接种细胞，有时细胞还需要驯化。性能的细胞培养基则要求能促进细胞的生长、存活率和细胞活力，培养的病毒增殖较快，同时价格不过于昂贵。
许多低血清和无血清vero细胞培养基以传统的合成培养基为基础。有机构研究了dmem／f12、m199、rpmi1640及mem∶dmem／f12四种培养基对流感病毒增殖的影响1。具体过程为：在上述培养基中分别加入浓度为1.0μg／ml的 tpck*，配制病毒培养液，调整ph为8.0。将t-225细胞培养瓶中长成致密单层的sfm-vero细胞，经0.125%的*消化后传代后，置37℃培养36h；洗液洗涤3次，以moi = 0.1接种h5n1流感病毒，33℃吸附1h；加入病毒培养液，置33℃培养72h，收获病毒液，测定血凝效价。结果显示，细胞培养时间为36 h。以dmem／f12为基础培养基时，病毒收获液的血凝效价均高于其他培养基，m199仅次于dmem／f12。
又有机构比较了含10%新生牛血清的m199和mem培养基对vero细胞生长的影响。发现m199显著好于mem。m199培养的细胞活力为94.35%，mem为80.50%，m199的细胞浓度为60万/ml，而mem为47.5万/ml2。
由于细胞培养基的成分较为复杂，且各个成分对细胞培养存在一定的协同作用，故以上结论仅作一定程度上的参考。dmem／f-12是dmem和f-12以1:1的比例混合而成，f-12配方则是以ham's f-10 培养基为基础，提高了*、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度，初是用于在无血清的条件下培养 cho 细胞。m199培养基则常用于疫苗生产、病毒学以及多种非转化细胞的培养。初的开发目的是找到一种成分明确的、不含动物来源成分的培养基。有报道将m199改良后，vero细胞培养效果优于m199，且病毒滴度更高3。
sfre m199即是一款m199的改良型，初用于原代狒狒肾(bak)细胞的生长和维持，后用于vero细胞的贴壁培养。它在m199培养基基础上添加了胰岛素、丙酮酸钠、硫酸锌，并提高了*-盐酸、半*、*、l -*、l -*、*、*、*和葡萄糖的浓度。它还添加了半乳糖，以避免乳酸过度积累，并使ph值在细胞延长的维持期内，保持在生理范围。生物科学公司himedia生产有sfre m199的1型和2型。二者均含有l-*、半乳糖和葡萄糖。sfre m199-2（货号at090）含有earle's盐，而sfre m199-1含有hank盐。两种盐的主要差别在于*的水平, *在eagles (2.2g/l)比在hanks (0.35g/l) 中高。选用哪种取决于培养环境中的co2浓度。
sfre m199-1与dmem／f-12的成分作比较，可以发现，sfre m199-1不含dmem／f-12所含有的硫酸铜、*、*、腐胺、硫锌酸，但含有dmem／f-12所不含的核苷类成分，如一磷酸腺苷、胸腺嘧啶、*、脱氧核糖、硫酸腺嘌呤等，这些成分都与dna的合成有关。另外，在一些共有成分上，两种培养基的成分浓度互有高低，如sfre m199-1的*、*、天*、*、*、*、*、丙酮酸钠的浓度都比dmem／f-12要高，dmem／f-12的异*、赖氨酸、苯*、*、*、*、*、吡哆醛盐酸盐、肌醇、葡萄糖、次黄嘌呤浓度比sfre m199-1的成分浓度高。
目前，由于配方保密，关于vero细胞无血清或低血清培养基的具体成分并未*公开。由于改良型m199以及vero细胞用sfre m199培养时有报道3、4、5可见想见，sfre m199取代m199来大规模培养vero细胞，是将来发展的趋势。
himedia laboratories公司是的培养基生产厂家，其生产通过了iso9001、iso13485、who-gmp的质量管理体系认证。缔一生物作为中国区代理商，在生物制药，疫苗生产，科研，临床治疗等领域，提供有可靠的各种培养基及进口血清、支原体检测试剂等，持续不断地为中国生物产业的发展助力。
参考文献
1. 马磊，等.用无血清适应的vero细胞培养h5n1型流感病毒条件的优化.中国生物制品血杂志.2015,28(7):741-744
2. 薛英，等.不同培养基及不同的葡萄糖浓度对vero细胞生长状况的影响.草食家畜.2010,12(4):70-71
3. 陈嘉雯,等.改良m199培养基在vero细胞培养中的适用性.中国生物制品血杂志.2014,1(27):76-81
4. 吴长安. 无血清化学限定培养基对原代细胞的培养及其对病毒的敏感性. 国外医学.生物制品分册. 1981, 4:190-191
5. jack litwin. the growth of vero cells as suspended aggregates in serum-free medium.animal cell technology, 1992: 414-417
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又有机构比较了含10%新生牛血清的m199和mem培养基对vero细胞生长的影响。发现m199显著好于mem。m199培养的细胞活力为94.35%，mem为80.50%，m199的细胞浓度为60万/ml，而mem为47.5万/ml2。
由于细胞培养基的成分较为复杂，且各个成分对细胞培养存在一定的协同作用，故以上结论仅作一定程度上的参考。dmem／f-12是dmem和f-12以1:1的比例混合而成，f-12配方则是以ham's f-10 培养基为基础，提高了*、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度，初是用于在无血清的条件下培养 cho 细胞。m199培养基则常用于疫苗生产、病毒学以及多种非转化细胞的培养。初的开发目的是找到一种成分明确的、不含动物来源成分的培养基。有报道将m199改良后，vero细胞培养效果优于m199，且病毒滴度更高3。
sfre m199即是一款m199的改良型，初用于原代狒狒肾(bak)细胞的生长和维持，后用于vero细胞的贴壁培养。它在m199培养基基础上添加了胰岛素、丙酮酸钠、硫酸锌，并提高了*-盐酸、半*、*、l -*、l -*、*、*、*和葡萄糖的浓度。它还添加了半乳糖，以避免乳酸过度积累，并使ph值在细胞延长的维持期内，保持在生理范围。生物科学公司himedia生产有sfre m199的1型和2型。二者均含有l-*、半乳糖和葡萄糖。sfre m199-2（货号at090）含有earle's盐，而sfre m199-1含有hank盐。两种盐的主要差别在于*的水平, *在eagles (2.2g/l)比在hanks (0.35g/l) 中高。选用哪种取决于培养环境中的co2浓度。
sfre m199-1与dmem／f-12的成分作比较，可以发现，sfre m199-1不含dmem／f-12所含有的硫酸铜、*、*、腐胺、硫锌酸，但含有dmem／f-12所不含的核苷类成分，如一磷酸腺苷、胸腺嘧啶、*、脱氧核糖、硫酸腺嘌呤等，这些成分都与dna的合成有关。另外，在一些共有成分上，两种培养基的成分浓度互有高低，如sfre m199-1的*、*、天*、*、*、*、*、丙酮酸钠的浓度都比dmem／f-12要高，dmem／f-12的异*、赖氨酸、苯*、*、*、*、*、吡哆醛盐酸盐、肌醇、葡萄糖、次黄嘌呤浓度比sfre m199-1的成分浓度高。
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3. 陈嘉雯,等.改良m199培养基在vero细胞培养中的适用性.中国生物制品血杂志.2014,1(27):76-81
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