固体培养法

固体培养法是指将微生物接种在固体培养基上生长繁殖的方法,固体培养基包括琼脂平板和琼脂斜面。琼脂平板用于菌落计数和分离菌落,琼脂斜面用于微生物形态观察或保藏,接种后的平板倒置(防止冷凝水滴落到生长的菌体上),堆叠(一般不超过6个平皿)放于恒温培养箱中,培养皿之间和培养皿距离箱壁至少要25 mm,保证空气循环,这时,对各个点的温度要进行验证。为防止培养基过分干燥,可用塑料袋松散的包一下,也可以在培养箱内放一杯水防止培养基干瘪。斜面试管放于试管架上,然后放置于培养箱中进行培养。除此两种方法属固体培养法外,还有以下几种。
(一)插片培养法
(1)用高压灭菌后冷却到50℃左右的培养基制备平板,凝固后用接种环挑取菌悬液划线接种。
(2)将灭过菌的盖玻片以450斜插入固体培养基中,紧靠接种物,使菌体沿盖玻片生长,置28 ℃~32 ℃恒温培养箱培养3d-5 d。
(3)培养完毕后,取出盖玻片放在载玻片上,直接用低倍镜观察放线菌的自然生长个体形态。也可在载玻片上滴一滴0.1%的美蓝水溶液,再放上插片,用高倍镜观察孢子结构。
(二)载玻片培养法
(1)在培养皿底部铺一张圆形滤纸,滤纸上放上一根“u形载玻片搁架,其上放一块干净的载玻片和两片盖玻片,盖上皿盖,外用纸包扎,高压灭菌后,烘干备用。
(2)将经过高压灭菌冷却到50 ℃左右的培养基,倒入另外的无菌培养皿中制成2mm厚的平板,凝固后用无菌刀切成1cm2的方块,放置于载玻片上左右各一块。
(3)琼脂块的四周用接种针接种上霉菌孢子,而后盖上盖玻片,压紧琼脂块,在滤纸上加2 ml -3 ml。无菌水或20%无菌甘油,保湿培养,培养好后,可直接用低倍镜观察
(三)透析膜培养法
透析膜浸在试管中高压灭菌后,用无菌的镊子取出后平铺在琼脂平板上,在膜上用接种工具点接上菌种,盖好皿盖后,进行培养。也可直接把透析膜放在液体培养基里浸泡后,直接铺在平皿中,灭菌后进行点种微生物,再盖上皿盖进行培养。
(四)其他
应用在酿造工业上的培养瓶培养,盘曲、帘子曲培养,厚层通风培养。

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