原料分享 | 中疾控：流感上升 ！翌圣酶原料又稳又快有方案！
近日，中疾控发布最新一期第47周（11月20-26日）《流感监测周报》。从监测数据可以看出，全国南北方流感疫情仍在不断上升，目前已达到近10年，如下图所示。自40周开始，全国每周流感疫情暴发起数便不断上升，病原监测结果表明，均以a型h3n2为主。
2023年10月以来，先以肺炎支原体起势，甲乙流接力，伴随合胞病毒和新冠感染，而随着气温下降，感染性腹泻也进入了高发期，主要是由诺如病毒、轮状病毒感染引起。病原体的快速检测和准确诊断是感染性疾病有效治疗的重要前提，但仅依靠传统微生物学及免疫学技术，近 70%的患者无法明确病原学诊断［1］。为此，中华检验医学培训工程专家委员会联合中华医学会呼吸病学分会组织我国多学科专家共同撰写了《成人呼吸道感染病原诊断核酸检测技术临床应用专家共识( 2023)》，指出实时荧光pcr包括单靶标或多靶标呼吸道病原体核酸检测，可作为核酸即时检测的参考方法，主要适用于门急诊、住院患者和大规模人群筛查。
翌圣感染性疾病检测解决方案
翌圣生物在酶原料领域深耕多年，长期为ivd企业提供高品质、高性价比的原料，对于荧光定量pcr、等温扩增、高通量测序等检测方法均有相应的解决方案，可为临床诊断试剂盒开发提供性能优越、稳定的酶原料。
解决方案一荧光定量pcr原料
荧光定量pcr技术是世界各国疾控中心（cdc）采用的金标准，可以检测患者样本中微量病原体，是传染病病毒传播早期诊断的主要方法。目前翌圣生物稳定供应、且有多家客户用于报证的常规液体版预混液，支持引物探针全预混的“一管式”试剂，稳定性更强、适配性更灵活的可冻干的预混液以及超低残留的单酶原料等，均有现货可提供。
部分产品
产品
产品名称
货号
qpcr预混液
耐抑制性强
hieff unicon®universal taqman multiplex qpcr master mix
11211es
支持全预混
hieff unicon®superpro i taqman qpcr master mix（udgplus）
11827es
可冻干
hieff unicon®lyo-taqman multiplex qpcr kit
13695es
高灵敏、快速
hifair®v c58p2 multiplex one step rt-qpcr probe kit(udg plus)
13650es
支持全预混
hifair®superproionesteprt-qpcrmastermix
11899es
可冻干
hifair®lyo multiplex one step rt-qpcr kit
11831es
单酶
低宿主残留taq酶
hieff ucf.me®hotstart sensitive taq dna polymerase (5 u/μl)
14314es
低宿主残留逆转录酶
hifair ucf.me®v reverse transcriptase (200 u/μl)
14608es
低宿主残留udg酶
ucf.me®uracil dna glycosylase (udg/ung), 1 u/μl
14453es
低宿主残留rnase抑制剂
ucf.me®murine rnase inhibitor (40 u/µl)
14672es
解决方案二等温扩增原料
等温扩增技术（isothermal amplification technology, iat）因其无需专用的仪器设备、扩增时间短、灵敏度高等特点，在现场检测和即时诊断中显示了良好的应用前景。其中环介导等温扩增（loop mediated isothermal amplification,lamp）是当前最常见、应用泛的等温扩增技术，其使用具有链置换特性的bst dna聚合酶，在60-65℃条件下高效、快速、特异性扩增靶标序列，可在15-60 min内实现109-1010倍的扩增。此外，重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification，rpa）作为一种新型核酸恒温扩增技术也是当前的研究热门，其可在37~42 ℃条件下，10-30 min内实现待测靶标的快速检测。目前，等温扩增技术已逐步应用于病原菌、寄生虫、病毒、疾病和转基因产品检测等领域。翌圣生物针对lamp及rpa产品开发也有相关酶原料可供选择。
部分产品
产品
产品名称
货号
lamp原料
荧光染料法
rt-lamp dye assay kit(udg plus)
13762es
ph法可冻干
rt-lamp ph敏感染料显色版可冻干试剂
13920es
bst酶
lyophilized bst plus dna polymerase ( 60 u/μl，glycerol-free)
14405es
rpa原料
bsu聚合酶
bsudnapolymerase(largefragment,5u/μl)
11078es
重组酶
t4 uvsx recombinase (2 μg/μl)
11079es
重组蛋白
t4 uvsy protein (2 μg/μl)
11080es
单链结合蛋白
t4 gene 32 protein (gp 32)
11081es
肌酸激酶
creatine kinase (2 μg/μl) 肌酸激酶
14502es
解决方案三高通量测序（ngs）原料
感染性疾病检测一直是大家颇为关注的领域，已形成群雄逐鹿的市场格局，面对不明原因感染、多重感染等情况，ngs的高通量相对qpcr及等温扩增的优势即凸显出来了。mngs方兴未艾，tngs持续火爆，共建库需求也日益激增。虽然mngs、tngs和共建库等从技术到产品不断推陈出新，但时效性、检出率和低背景菌残留一直是大家的追求。翌圣生物经过匠心研发，开发出一系列超快速、高效率和低残留产品解决方案，助力病原微生物快速、精准诊断。
部分产品
产品
产品名称
货号
mngs
dna机械法建库
hieff ngs®ultima dna library prep kit
13489es/13508es
dna快速酶切建库
hieff ngs®onepot flash dna library prep kit
12316es
total rna建库
hieff ngs®one-step rrna removal kit（human/mouse/rat）
12258es
tngs
共建库（衔接探针捕获）
hieff ngs®c168p1 onepot dna&rna library co-prep kit(with rrna remover)一步法dna&rna共建库试剂盒（rrna去除）
13574es
逆转录
hieff ngs®1st strand synthesis kit
12249es
多重pcr
4×hieff®multiplex pcr master mix
12948es
产品性能展示
1、hifair®v c58p2 multiplex one step rt-qpcr probe kit（udgplus）（cat#13650）
2×mix预混合试剂，含有双封闭抗体封闭的热启动taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，且引入了dutp/udg防污染系统，可有效防止气溶胶污染。
加速稳定性（37℃7d）
使用37℃热加速的13650，同时检测新冠假病毒的orf基因和n基因（50copies/t），结果表明该预混液在37℃放置3d、5d、7d后，对低浓度的样本均能全部检出（8/8），峰型无差异，产品性能稳定。
2、hifair®lyo multiplex one step rt-qpcr kit（cat#11831）
本品不含甘油，同时匹配了冻干保护剂，可以直接用于冻干。既可作为液体试剂直接检测，亦可冻干后长期储存，稳定性强，性能优越。并可免费提供参考冻干工艺sop。
加速稳定性（50℃25d）
将yeasen 11831es可冻干试剂冻干成冻干微芯后，使用不同条件处理（正常保存作为对照，50℃加速14天及25天）的冻干微芯，同时扩增105、104、103copies/ml 的新冠假病毒模板，结果显示：冻干品加速前后ct值和荧光值均无显著变化，冻干产品稳定性良好。
3、hieff ucf.me®hotstart sensitive taq dna polymerase（cat#14314）
经过zymeeditor™平台的超高通量定向进化技术对序列进行改造，hieff ucf.me®sensitive taq dna polymerase和底物的亲和性相比普通taq dna聚合酶得到了较大的提升，因此其灵敏度更高，可广泛用于病原微生物检测等应用场景。
e.coli基因组dna残留＜0.5 copies/100 u
(a) e. coli基因组线性范围：30 fg/μl-300 pg/μl，相关性r2=0.9999。
(b) 三批次hieff ucf.me®sensitive taq dna polymerase的e. coli基因组dna残留＜0.5 copies/ 100 u
翌圣生物生产基地配备工业级akta纯化与理化分析设备、百升级高密度发酵机组、万级标准洁净车间和自动化生产线，按照iso13485质量体系管理，通过全封闭式超洁净生产工艺制造的分子酶，保证了分子酶的洁净度和稳定性。此外，拥有不同规格的发酵纯化系统，在分子酶产业化领域具备从 5l 到 1,500l 的逐级放大生产能力，可充分满足下游客户在研发、中试与大规模生产等不同阶段的核心原料需求。此外，翌圣在全国设有上海、北京、武汉等6大仓库，发货周期短。在保障原料性能优越、稳定的同时，对于供货的快速、稳定亦有保障！
参考文献：
[1]瞿介明，刘海霞．病原体分子诊断技术在下呼吸道感染诊断中的应用及其价值［j］. 中华结核和呼吸杂志，2019，42: 486-489.
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2023年10月以来，先以肺炎支原体起势，甲乙流接力，伴随合胞病毒和新冠感染，而随着气温下降，感染性腹泻也进入了高发期，主要是由诺如病毒、轮状病毒感染引起。病原体的快速检测和准确诊断是感染性疾病有效治疗的重要前提，但仅依靠传统微生物学及免疫学技术，近 70%的患者无法明确病原学诊断［1］。为此，中华检验医学培训工程专家委员会联合中华医学会呼吸病学分会组织我国多学科专家共同撰写了《成人呼吸道感染病原诊断核酸检测技术临床应用专家共识( 2023)》，指出实时荧光pcr包括单靶标或多靶标呼吸道病原体核酸检测，可作为核酸即时检测的参考方法，主要适用于门急诊、住院患者和大规模人群筛查。
翌圣感染性疾病检测解决方案
翌圣生物在酶原料领域深耕多年，长期为ivd企业提供高品质、高性价比的原料，对于荧光定量pcr、等温扩增、高通量测序等检测方法均有相应的解决方案，可为临床诊断试剂盒开发提供性能优越、稳定的酶原料。
解决方案一荧光定量pcr原料
荧光定量pcr技术是世界各国疾控中心（cdc）采用的金标准，可以检测患者样本中微量病原体，是传染病病毒传播早期诊断的主要方法。目前翌圣生物稳定供应、且有多家客户用于报证的常规液体版预混液，支持引物探针全预混的“一管式”试剂，稳定性更强、适配性更灵活的可冻干的预混液以及超低残留的单酶原料等，均有现货可提供。
部分产品
产品
产品名称
货号
qpcr预混液
耐抑制性强
hieff unicon®universal taqman multiplex qpcr master mix
11211es
支持全预混
hieff unicon®superpro i taqman qpcr master mix（udgplus）
11827es
可冻干
hieff unicon®lyo-taqman multiplex qpcr kit
13695es
高灵敏、快速
hifair®v c58p2 multiplex one step rt-qpcr probe kit(udg plus)
13650es
支持全预混
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11899es
可冻干
hifair®lyo multiplex one step rt-qpcr kit
11831es
单酶
低宿主残留taq酶
hieff ucf.me®hotstart sensitive taq dna polymerase (5 u/μl)
14314es
低宿主残留逆转录酶
hifair ucf.me®v reverse transcriptase (200 u/μl)
14608es
低宿主残留udg酶
ucf.me®uracil dna glycosylase (udg/ung), 1 u/μl
14453es
低宿主残留rnase抑制剂
ucf.me®murine rnase inhibitor (40 u/µl)
14672es
解决方案二等温扩增原料
等温扩增技术（isothermal amplification technology, iat）因其无需专用的仪器设备、扩增时间短、灵敏度高等特点，在现场检测和即时诊断中显示了良好的应用前景。其中环介导等温扩增（loop mediated isothermal amplification,lamp）是当前最常见、应用泛的等温扩增技术，其使用具有链置换特性的bst dna聚合酶，在60-65℃条件下高效、快速、特异性扩增靶标序列，可在15-60 min内实现109-1010倍的扩增。此外，重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification，rpa）作为一种新型核酸恒温扩增技术也是当前的研究热门，其可在37~42 ℃条件下，10-30 min内实现待测靶标的快速检测。目前，等温扩增技术已逐步应用于病原菌、寄生虫、病毒、疾病和转基因产品检测等领域。翌圣生物针对lamp及rpa产品开发也有相关酶原料可供选择。
部分产品
产品
产品名称
货号
lamp原料
荧光染料法
rt-lamp dye assay kit(udg plus)
13762es
ph法可冻干
rt-lamp ph敏感染料显色版可冻干试剂
13920es
bst酶
lyophilized bst plus dna polymerase ( 60 u/μl，glycerol-free)
14405es
rpa原料
bsu聚合酶
bsudnapolymerase(largefragment,5u/μl)
11078es
重组酶
t4 uvsx recombinase (2 μg/μl)
11079es
重组蛋白
t4 uvsy protein (2 μg/μl)
11080es
单链结合蛋白
t4 gene 32 protein (gp 32)
11081es
肌酸激酶
creatine kinase (2 μg/μl) 肌酸激酶
14502es
解决方案三高通量测序（ngs）原料
感染性疾病检测一直是大家颇为关注的领域，已形成群雄逐鹿的市场格局，面对不明原因感染、多重感染等情况，ngs的高通量相对qpcr及等温扩增的优势即凸显出来了。mngs方兴未艾，tngs持续火爆，共建库需求也日益激增。虽然mngs、tngs和共建库等从技术到产品不断推陈出新，但时效性、检出率和低背景菌残留一直是大家的追求。翌圣生物经过匠心研发，开发出一系列超快速、高效率和低残留产品解决方案，助力病原微生物快速、精准诊断。
部分产品
产品
产品名称
货号
mngs
dna机械法建库
hieff ngs®ultima dna library prep kit
13489es/13508es
dna快速酶切建库
hieff ngs®onepot flash dna library prep kit
12316es
total rna建库
hieff ngs®one-step rrna removal kit（human/mouse/rat）
12258es
tngs
共建库（衔接探针捕获）
hieff ngs®c168p1 onepot dna&rna library co-prep kit(with rrna remover)一步法dna&rna共建库试剂盒（rrna去除）
13574es
逆转录
hieff ngs®1st strand synthesis kit
12249es
多重pcr
4×hieff®multiplex pcr master mix
12948es
产品性能展示
1、hifair®v c58p2 multiplex one step rt-qpcr probe kit（udgplus）（cat#13650）
2×mix预混合试剂，含有双封闭抗体封闭的热启动taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，且引入了dutp/udg防污染系统，可有效防止气溶胶污染。
加速稳定性（37℃7d）
使用37℃热加速的13650，同时检测新冠假病毒的orf基因和n基因（50copies/t），结果表明该预混液在37℃放置3d、5d、7d后，对低浓度的样本均能全部检出（8/8），峰型无差异，产品性能稳定。
2、hifair®lyo multiplex one step rt-qpcr kit（cat#11831）
本品不含甘油，同时匹配了冻干保护剂，可以直接用于冻干。既可作为液体试剂直接检测，亦可冻干后长期储存，稳定性强，性能优越。并可免费提供参考冻干工艺sop。
加速稳定性（50℃25d）
将yeasen 11831es可冻干试剂冻干成冻干微芯后，使用不同条件处理（正常保存作为对照，50℃加速14天及25天）的冻干微芯，同时扩增105、104、103copies/ml 的新冠假病毒模板，结果显示：冻干品加速前后ct值和荧光值均无显著变化，冻干产品稳定性良好。
3、hieff ucf.me®hotstart sensitive taq dna polymerase（cat#14314）
经过zymeeditor™平台的超高通量定向进化技术对序列进行改造，hieff ucf.me®sensitive taq dna polymerase和底物的亲和性相比普通taq dna聚合酶得到了较大的提升，因此其灵敏度更高，可广泛用于病原微生物检测等应用场景。
e.coli基因组dna残留＜0.5 copies/100 u
(a) e. coli基因组线性范围：30 fg/μl-300 pg/μl，相关性r2=0.9999。
(b) 三批次hieff ucf.me®sensitive taq dna polymerase的e. coli基因组dna残留＜0.5 copies/ 100 u
翌圣生物生产基地配备工业级akta纯化与理化分析设备、百升级高密度发酵机组、万级标准洁净车间和自动化生产线，按照iso13485质量体系管理，通过全封闭式超洁净生产工艺制造的分子酶，保证了分子酶的洁净度和稳定性。此外，拥有不同规格的发酵纯化系统，在分子酶产业化领域具备从 5l 到 1,500l 的逐级放大生产能力，可充分满足下游客户在研发、中试与大规模生产等不同阶段的核心原料需求。此外，翌圣在全国设有上海、北京、武汉等6大仓库，发货周期短。在保障原料性能优越、稳定的同时，对于供货的快速、稳定亦有保障！
参考文献：
[1]瞿介明，刘海霞．病原体分子诊断技术在下呼吸道感染诊断中的应用及其价值［j］. 中华结核和呼吸杂志，2019，42: 486-489.
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