纤连蛋白（FN）ELISA现货
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断
人（human）纤连蛋白（fn）elisa检测试剂盒
上海轩泽康生物有限公司
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被纤连蛋白（fn）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤连蛋白（fn）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），计算样品浓度。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3.37℃恒温箱
试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12孔×8条
12孔×4条
无
标准品
0.3ml*6管
0.3ml*6管
无
样本稀释液
6ml
3ml
无
检测抗体-hrp
10ml
5ml
无
20×洗涤缓冲液
25ml
15ml
按说明书进行稀释
底物a
6ml
3ml
无
底物b
6ml
3ml
无
终止液
6ml
3ml
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无
注：标准品（s0-s5）浓度依次为：批次差异有所不同，联系我司销售人员
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μl，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
免责声明
1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被纤连蛋白（fn）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤连蛋白（fn）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），计算样品浓度。
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1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
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试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
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12孔×8条
12孔×4条
无
标准品
0.3ml*6管
0.3ml*6管
无
样本稀释液
6ml
3ml
无
检测抗体-hrp
10ml
5ml
无
20×洗涤缓冲液
25ml
15ml
按说明书进行稀释
底物a
6ml
3ml
无
底物b
6ml
3ml
无
终止液
6ml
3ml
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无
注：标准品（s0-s5）浓度依次为：批次差异有所不同，联系我司销售人员
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
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1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μl，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
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1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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