高效液相色谱仪测定奶制品中三聚氰胺
1.高效液相色谱仪测定奶制品中三聚氰胺引用标准：
按照国家标准gb/t22388-2008，三聚氰胺简称三胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料。因三聚氰胺分子中含有大量氮元素，一些不法厂商通过添加这种化工原料，提高产品中蛋白质含量。
2.高效液相色谱仪测定奶制品中三聚氰胺方法原理：
采用hplc法测定三聚氰胺，成本低，不需要衍生，简便易行。采用外标法进行定量分析。
本方法采用lc-600二元高压梯度，按照国家标准gb/t22388-2008对牛奶中三聚氰胺进行检测。该方法稳定可靠，检测范围广泛。
3.奶制品测定仪器和试剂：
lc-600液相色谱仪二元高压梯度系统：*，配梯度单元和在线脱气装置；lc-600紫外检测器；手动进样器7725i，色谱工作站n2000p,离心机1台(转头6*50ml)；固相萃取小柱和萃取装置；氮吹仪；
三聚氰胺对照品购自sigma公司，样品液态奶购买于超市，实验中用到的其他试剂如三***、氢氧化钠、柠檬酸和辛烷磺酸钠均为分析级。
4.三聚氰胺测定色谱条件：
色谱柱：venusilasb-c184.6250mm(也可选用c8柱)
缓冲液：10mm柠檬酸,10mm辛烷磺酸钠
流动相：缓冲溶液:乙腈=90：10
进样量：20ul
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
5.样品制备：
按照gb/t22388-2008中3.4节进行：称取2g(**到0.01g)试样(液态纯牛奶)于50ml具塞塑料离心管中，加入15ml1%三***提取液和5ml乙腈，充分混匀，超声提取20min，再振荡提取10min后，以4000r/min离心10min。上清液经三***溶液润湿的滤纸过滤后，用三***溶液定容至25ml，移取5ml滤液，过混合型阳离子固相萃取小柱(pcx)。洗脱液于50℃下氮气吹干，残留物用20%甲醇的水溶液定容至1ml。
6.定性分析：
称取三聚氰胺标准品适量，流动相溶解，按照上述色谱条件，进入色谱仪分析。保留时间分别为4.75min。
7.样品测试：
按照上述样品处理方法和色谱条件，对样品进行测定，得到色谱图如图1所示。平行测试4次，计算平均峰面积，并以外标法对三聚氰胺的含量进行计算。结果得出样品中含三聚氰胺1.029mg/l。
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2.高效液相色谱仪测定奶制品中三聚氰胺方法原理：
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本方法采用lc-600二元高压梯度，按照国家标准gb/t22388-2008对牛奶中三聚氰胺进行检测。该方法稳定可靠，检测范围广泛。
3.奶制品测定仪器和试剂：
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4.三聚氰胺测定色谱条件：
色谱柱：venusilasb-c184.6250mm(也可选用c8柱)
缓冲液：10mm柠檬酸,10mm辛烷磺酸钠
流动相：缓冲溶液:乙腈=90：10
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5.样品制备：
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6.定性分析：
称取三聚氰胺标准品适量，流动相溶解，按照上述色谱条件，进入色谱仪分析。保留时间分别为4.75min。
7.样品测试：
按照上述样品处理方法和色谱条件，对样品进行测定，得到色谱图如图1所示。平行测试4次，计算平均峰面积，并以外标法对三聚氰胺的含量进行计算。结果得出样品中含三聚氰胺1.029mg/l。
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