实验干货 | 常用分子生物学技术原理
1. 分子杂交与印迹技术
（1）探针是经过特殊标记，能与待测单链核酸分子互补结合的已知核酸片段
（2）印迹是将电泳分离后的大分子转印到硝酸纤维素膜上，以便杂交的技术
（3）dna印迹：southern blotting，用于检测基因组dna
（4）rna印迹：northern blotting，主要用来检测mrna的表达水平
（5）蛋白质印迹：western blotting，用于检测蛋白质的水平
2. pcr技术
（1）反应体系：单链dna模板、特异性dna引物、耐热dna聚合酶（taq dna聚合酶）、dntps底物、含mg2+的缓冲液。
（2）反应步骤：变性、复性、延伸
（3）逆转录pcr：即rt-pcr，在pcr之前先将单链mrna逆转录成cdna。这是目前从rna水平出发研究基因表达或获得目的基因有效的方法。
（4）应用：目的基因的克隆、基因的体外突变、微量dna或rna扩增、dna序列测定、基因突变分析
3. 蛋白质相互作用研究
酵母双杂交技术、coip
4. dna-蛋白质相互作用
电泳迁移率变动分析（emsa）、染色质免疫沉淀技术（chip）
5. 基因敲除
即gene knock-out，通过同源基因重组原理使得某个基因活性丧失，从而研究该基因功能的方法
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