随着分子生物学的发展,聚合酶链式反应(pcr)技术的应用领域越来越广。pcr 技术具有操作方便、灵敏度高等优点。但也正是由于其*的灵敏度,使得极其微量的污染便可造成假阳性结果。如何克服污染现已成为 pcr 检测急需解决的问题。
传统的 dna 污染清除多通过修饰、酶解(如 dnase)或变性等几种方式。实践证明这些方式存在不能*破坏 dna 分子、试剂具有腐蚀性和毒性等不足。
方式
原理
不足
修饰
标记遗传物质,阻止聚合酶与核酸的结合,从而抑制dna 扩增。
这种标记均为可逆反应,一旦发生去修饰反应即可被聚合酶结合;试剂可能具有腐蚀性。
酶解
酶可将长链的核酸分子降解成小片段。
降解的核酸中仍有大片段存在,具有完整的遗传信息,可通过pcr扩增出完整的片段。
高压变性
高压可将核酸降解成20~30bp 的小片段。
仅适用于耐高压材料,更无法应用实验操作台和大型的实验设备。
dna-exitusplus™是一种无腐蚀、无致癌性的核酸(包括 dna、rna)清除溶液。该产品可断裂双链 dna 并将其*降解,而且已降解的核酸片段不能被恢复,从而*消除 pcr 过程中由于非目标 dna 导致的假阳性扩增。 dna-exitusplus™特点:
溶液为非酶类试剂;
溶液中各组分具有协同促进作用,可快速地、非序列
特异性地降解 dna 及 rna 污染;
所有组分可生物降解,无毒无害;
不含无机酸或碱性物质,不会对金属形成腐蚀;
不含有机溶剂或挥发性物质;
升温至 50°c 可提高反应速度。
dna-exitusplus™使用说明:1. 经 dna-exitusplus™处理过的台面无需再用灭菌水清洗,避免二次污染的发生。2. 溶液干燥后不再具有活性,不要通过延长时间来增强处理效果,对于严重污染区建议做多次处理。3. 溶液中添加了指示剂,干燥后呈紫色或蓝色,可擦拭不会在器物表面留下痕迹。使用方法:实验操作台表面直接将 dna-exitusplus™喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗。仪器表面用布或纸巾蘸取适量 dnaexitusplus™擦拭仪器表面,充分作用后再用干净湿布擦一遍即可。一些小的部件可在 dna-exitusplus™中浸泡10min 左右,然后用清水冲洗、晾干。塑料及玻璃器皿向容器中加入足量的 dna-exitusplus™,摇晃以确保器皿内壁全部接触到溶液,充分作用后弃去溶液晾干,用蒸馏水冲洗干净晾干即可。移液器遵照移液器说明拆取移液器的管嘴连件,于 dna-exitusplus™中浸泡1min,然后用清水冲洗干净晾干便可安装到移液器上。解剖刀、镊子等实验器材先用蘸有 dna-exitusplus™的布擦拭一遍,然后将镊子等器材于 dna-exitusplus™中浸泡10min 以上,也可通过加热到50~60℃缩短处理时间。
南京沃博生物常备现货。
关键词:玻璃器皿 移液器 实验器材
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