活体成像试剂之荧光素

生物化学发光检测是活体成像技术之一。生物化学发光法是基于荧光素酶能催化底物化学发光的原理,将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应产生atp,生成激发态的氧化荧光素,当回复至基态时多余的能量以光子形式释放,再利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。该技术已被广泛应用于多个领域,例如肿瘤或疾病动物模型的建立,还可用于病毒学研究、sirna研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。
常见的荧光素酶有两种,分别是萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。前者底物使用d-荧光素(d-luciferin),后者底物使用腔肠素(coelenterazine)。它们共同的作用原理是在atp和荧光素酶的催化作用下,底物被氧化发光(不同底物光的颜色和波长不同),当底物过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。

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