atcc,全名为:american type culture collection,细胞库的细胞数量排名qian列。atcc细胞培养方法,广泛应用于生产领域和生物医学研究,已成为细胞培养的标准。该方法共分为6大步骤,分别是:
一、培养基的选择:细胞种类不同,培养基的选择不同,常见的培养基有:mem培养基、rpmi培养基、dmem培养基等。根据细胞类型不同,选择性的加入10%的胎牛血清、抗生素、抗真菌药物等。
二、细胞的准备:取出细胞,置于无菌条件,用pbs(含有钙和镁)2-3次洗涤细胞,去掉冻存液。
三、细胞的接种:将细胞转移到无菌培养皿(含有培养基)。培养皿容积应根据培养时间、细胞数量来确定。
四、细胞培养:将培养皿放置在37℃的培养箱中,保持湿润的环境。定期更换培养基(频率为:2天/次)。细胞密度需要控制,不要过度密集。
五、细胞分离:细胞密度达到一定程度后,用胰酶或edta等酶类将细胞进行消化,消化后的细胞分离到新的培养皿中。
六、细胞冻存:细胞密度适中时,用液氮来冻存细胞。
注意:1.细胞培养的整个过程都需要消毒处理,防止细胞被污染 。
2.定期检查细胞的各项指标,如生长情况、细胞状态、是否污染等。
上述atcc细胞培养方法,助您细胞培养一臂之力!
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