单克隆抗体法和联苯胺法检测粪便隐血试剂盒的对比
粪便潜血检查方法国内主要有化学检测法和试剂带法两种,化学大便潜血检查试剂是利用血红蛋白中的亚铁血红素,有类似过氧化物酶的作用,具有弱过氧化物酶活动,能催化过氧化物酶,放出新生态氧,将无色的受体氧化为显色的物质的性质。现主要粪便隐血试剂带法主要利用免疫的方法检测人呕吐物中的人血红蛋白(hb)。在检验试纸条的检测线包被有抗人血红蛋白抗体,质控线包被有羊抗鼠igg抗体,在检测试纸条加样的一端固定有另一抗人血红蛋白单克隆抗体标记的胶体金颗粒。经收集处理的标本与胶体金颗粒混合后,如存在人血红蛋白时,样品有hb会与和胶体金上的抗体结合,可在检测线上出现红色色带。
fobt 是临床常规检验项目之一,主要是检测粪便中的血红蛋白,对消化道肿 瘤、消化道出血性疾病的早期诊治具有非常重要的价值。愈创木脂法是最早用 于 fobt 检测的方法,随后出现的方法包括邻联甲苯胺法、匹拉米洞法、孔雀 绿法等 。
化学法的检测原理大致相同,均是基于血红蛋白中的亚铁血红素有 类似过氧化酶的活性,能催化 h 2o 2 作为电子受体使色原氧化呈色,且显色 深浅与血红蛋白水平呈正相关 。
邻联甲苯胺法较为灵敏,即使粪便中仅含有 少量的血红蛋白或存在具有过氧化物酶活性的物质,都会使检测结果呈阳性, 例如,受试者食用动物血液、内脏类食品或食用含有过氧化物酶的叶绿素的瓜 果蔬菜,均可能出现假阳性结果。因此,在采用邻联甲苯胺法进行 fobt 检测 前,应嘱咐患者素食 3 d,以及禁用铁剂等药物 。
其他可导致假阴性结果的因素包括:
(1)标本中血红蛋白浓度过高,受前带现象影响而出现假阴性结果;
(2)血红蛋白中的 珠蛋白链在胃酸的作用下迅速水解,或在小肠内被蛋白酶降解,导致血红蛋白 失去单克隆抗体可特异性识别、结合的抗原决定簇,或在体外或胃肠道内的细 菌作用下,粪便中的血红蛋白缺失免疫活性,导致出现假阴性结果;
(3)试 剂中的 h 2o 2 浓度降低,或因保存不当而失效;
(4)检测反应时间不足,显色 判断不准确。与邻联甲苯胺法相比,匹拉米洞半定量法的灵敏度有所降低,微 量血红蛋白可出现假阴性结果。
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