GB31658.17-2021多兽残处理方案
2022年食品安全抽检实施细则更新了针对于牛、羊、猪、鸡的肌肉、及肝、肾组织中部分四环素类、磺胺类和喹诺酮类的检测方法——《gb31658.17-2021动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》，中检维康参照该标准进行试验，并优化了部分参数，建立了一份具有良好回收率及稳定性，能满足国标要求的spe-hplc-ms/ms方法，可供参考。
1.样品提取
准确称取粉碎均匀的肉类样品1g(准确至0.01g)于干净离心管中，加入8mlmcllvaine-na2edta溶液，涡旋混匀后超声提取20min，-5℃下120000r/min离心5min，取出上清液于另一干净离心管，试样残
渣加入8ml磷酸盐缓冲液，同上述操作，合并两次提取液，-5℃下120000r/min离心5min，上清液待净化。
mcllvaine-na2edta缓冲液：取柠檬酸·一水12.9g、磷酸氢二钠·十二水10.9g、乙二胺四乙酸二钠·二水39.2g,加水900ml,用1mol/l的氢氧化钠溶液调节ph至5.0±0.2，用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液：取0.05mol/l磷酸二氢钠溶液190ml,用0.05mol/l磷酸氢二钠溶液稀释至1000ml。
2.样品净化
活化：固相萃取柱依次用5ml甲醇和5ml水活化。(cloverhlb,200mg/6ml)
上样：取上述待净化液加入活化好的固相萃取柱中。
淋洗：依次用5ml水，5ml5%甲醇-水溶液，抽干。
洗脱：用8ml甲醇：乙酸乙酯：氨水=50:50:2溶液进行洗脱。
收集全部洗脱液，45℃下氮吹至100μl左右，加入0.1%甲酸溶液定容至1ml,过ptfe亲水滤膜，上机测试。
3.基质标准曲线溶液的制备
取6个空白基质样品同正常样品一样操作，收集洗脱液后，于洗脱液中分别加入适量标液，再与其他样品洗脱液一同氮吹，定容，使最终上机溶液的浓度分别为2μg/l、10μg/l、50μg/l、100μg/l、200μg/l、500μg/l。
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渣加入8ml磷酸盐缓冲液，同上述操作，合并两次提取液，-5℃下120000r/min离心5min，上清液待净化。
mcllvaine-na2edta缓冲液：取柠檬酸·一水12.9g、磷酸氢二钠·十二水10.9g、乙二胺四乙酸二钠·二水39.2g,加水900ml,用1mol/l的氢氧化钠溶液调节ph至5.0±0.2，用水稀释至1000ml。
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活化：固相萃取柱依次用5ml甲醇和5ml水活化。(cloverhlb,200mg/6ml)
上样：取上述待净化液加入活化好的固相萃取柱中。
淋洗：依次用5ml水，5ml5%甲醇-水溶液，抽干。
洗脱：用8ml甲醇：乙酸乙酯：氨水=50:50:2溶液进行洗脱。
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取6个空白基质样品同正常样品一样操作，收集洗脱液后，于洗脱液中分别加入适量标液，再与其他样品洗脱液一同氮吹，定容，使最终上机溶液的浓度分别为2μg/l、10μg/l、50μg/l、100μg/l、200μg/l、500μg/l。
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