Elabscience Caspase 1活性检测试剂盒的原理与注意事项

elabscience®自主研发的 caspase 1 activity assay kit 采用分光光度法,可用于检测细胞、组织裂解液或其它样本的caspase 1活性。caspase 1 也称 interkeukin 1β conberting enzyme (ice),是caspase 家族中唯yi可以剪切 il-1β 前体蛋白或 il-18 前体产生相应成熟的细胞因子的 caspase。那么你知道elabscience caspase 1活性检测试剂盒的原理与注意事项吗?让我们一起来看看吧!
一、检测原理
elabscience caspase 1活性检测试剂盒是基于 caspase 1 可以催化底物ac-yvad-pna 产生黄色的 pna (p-nitroaniline),pna 在 405nm 附近有强吸收,从而可以通过测定吸光度来检测 caspase 1 的活性。
二、保存条件
-20°c 可保存一年。ac-yvad-pna (4 mm)应适当分装并避光保存,避免反复冻融。
三、注意事项
1. 所有待检样本都需检测蛋白浓度,由于样本裂解液中含有还原剂,不适合使用 bca 法进行蛋白浓度测定,推荐使用考马斯亮蓝法(bradford 法)。
2. 建议在正式实验前,选择2~3个预期差异大的样本进行预实验,若样本吸光值超过标准曲线的测量范围,则需稀释样本或者调整上样量再进行测定。
3. 进行caspase 1活性测定的样本,其蛋白浓度应在1~4 mg/ml,否则会影响实验结果的准确性。
4. 一次实验的细胞数目建议不低于 1×106个,组织样本不低于50mg,以便达到1~4 mg/ml的蛋白浓度。否则会影响实验的精准度,导致蛋白浓度过低,反应体系内活性 caspase 1过少而od值偏低。
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