组织/细胞RNA提取指南，摆脱选择综合征！
组织/细胞rna提取指南，摆脱选择综合征！
核糖核酸（rna），存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。rna的碱基主要有4种，即a（腺嘌呤）、g（鸟嘌呤）、c（胞嘧啶）、u（尿嘧啶），其中，u（尿嘧啶）取代了dna中的t（胸腺嘧啶）。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。
图1.dna和rna的结构
rna的分类人体一个细胞含rna约10pg（含dna约7pg）。在细胞中，根据结构功能的不同，rna主要分三类，即trna（转运rna），rrna（核糖体rna），mrna（信使rna）。mrna含量低，占细胞总rna的1%~5%。核糖体rna特点含量高，占细胞总rna的80%~85%。
表1：rna的结构和功能
特殊rna随着高通量组学技术的应用，在高等哺乳动物中已发现高达数十万种非编码rna，根据结构与功能可对其进行科学分类和系统命名，如trna、rrna、snrna、snorna、sirna、mirna、pirna和lncrna等。非编码rna是当今生命科学发展最为迅速的前沿领域之一，它不断更新人们对生命本质的认识，为生物遗传育种及人类重大疾病的干预、防治和药物研究等提供全新的思路与技术(amaral et al，2008)。
图2.非编码rna的生物学功能（cell. 2019 nov 14; 179(5): 1033–1055.）
rna研究的第一步为rna提取，高质量的rna是进行转录组测序、rt-pcr等试验的基础，然而由于rna单链结构的不稳定性和无处不在的rna酶，使得rna在提取过程中容易发生降解，同时，传统的rna提取方法毒性大，因此，提取出高质量的rna，选择合适的提取产品非常重要！
动物组织细胞rna提取
对于常规的新鲜或冻存的组织、贴壁细胞、悬浮细胞rna提取，我们molpure® cell/tissue total rna kit 细胞/组织总rna提取试剂盒19221es，适用于10-20 mg动物组织或(1-5)×106个动物细胞的总rna提取纯化。
产品特点rna纯度高：配有基因组dna吸附柱，可有效去除dna污染；
安 全：无需有毒的酚、氯仿等有机物抽提；
快速简便：无需异丙醇或乙醇沉淀操，操作过程30 min完成；
使用方便：全流程室温操作，无需冰浴和低温离心。
产品性能取106个杂交瘤细胞，分别使用19221和trizol（货号：10606es）提取总rna。之后测定浓度和琼脂糖凝胶电泳；同时取2 μl，使用hifair®ⅲ one step rt-qpcr sybr green kit（货号：11143es）进行定量测试小鼠gapdh。结果显示，molpure®cell/tissue rna kit能稳定提取rna，rna产量高，完整度较好。
图 2.rna 质量和浓度
图3.一步法反转录定量结果 （注：绿色为 19221，蓝色为 trizol）
老师们可能会疑问为什么不trizol或trizol相关的产品呢？因为trizol有它固有的缺点：
有难闻的刺鼻气味
提取过程用到的酚、氯仿都为有毒有机物
提取时间长
如果老师们从成本的角度考虑，我们也有性能优异的trizol提取产品。
molpure®trieasy plus total rna kit总 rna 提取试剂盒（带离心柱）19211es是利用molpure®rna column a1和改进的异硫氰酸胍/酚一步法（trizol法）来提取样品中的总rna，适用于trizol法所能提取的所有样本，包括各种动植物、细菌和细胞样品。该试剂盒方便快捷，1 h完成可完成操作，且不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程。
产品特点适用范围广：可通用动物、植物、细菌、细胞等样品
使用方便：“trizol+离心柱”形式，易于操作
快速简便：操作过程1 h完成
产品性能
取6×105左右个293t细胞，分别使用19211es和竞品提取总rna。之后测定浓度和琼脂糖凝胶电泳；结果显示，molpure®trieasy plus total rna kit 19211es能稳定提取rna，rna产量高，纯度和完整度较好。
图 4.rna 质量和浓度
trieasy™ total rna extraction reagent trieasy™ 总rna提取试剂 10606es是一种适用于各种动植物、细菌组织、细胞的总rna抽提试剂，具有的裂解能力，并有效抑制样本中rna的降解，保持rna的完整性。
trieasy™ ls total rna extraction reagent 液体总rna提取试剂（同trizol ls）19201es是一种适用于各种动植物、酵母、细菌等液体样本的总rna抽提试剂，具有的裂解能力，并有效抑制样本中rna的降解，保持rna的完整性。
molpure® cell/tissue mirna kit细胞/组织mirna提取试剂盒 19331es适用于trizol法所能提取的所有样本，包括各种动植物、细菌组织和培养细胞中总rna、mirna和其他各种小rna的提取。该试剂盒可选择提取包含mirna的总rna，或只针对microrna富集，不包含>200 nt其它rna，30min可完成单样本的提取。
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便携红外多组分煤气分析仪 六种气体浓度测定仪
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数控加工中心的参数设定
加厚保温防寒布用途说明
恒温恒湿试验箱温度梯度
核糖核酸（rna），存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。rna的碱基主要有4种，即a（腺嘌呤）、g（鸟嘌呤）、c（胞嘧啶）、u（尿嘧啶），其中，u（尿嘧啶）取代了dna中的t（胸腺嘧啶）。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。
图1.dna和rna的结构
rna的分类人体一个细胞含rna约10pg（含dna约7pg）。在细胞中，根据结构功能的不同，rna主要分三类，即trna（转运rna），rrna（核糖体rna），mrna（信使rna）。mrna含量低，占细胞总rna的1%~5%。核糖体rna特点含量高，占细胞总rna的80%~85%。
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特殊rna随着高通量组学技术的应用，在高等哺乳动物中已发现高达数十万种非编码rna，根据结构与功能可对其进行科学分类和系统命名，如trna、rrna、snrna、snorna、sirna、mirna、pirna和lncrna等。非编码rna是当今生命科学发展最为迅速的前沿领域之一，它不断更新人们对生命本质的认识，为生物遗传育种及人类重大疾病的干预、防治和药物研究等提供全新的思路与技术(amaral et al，2008)。
图2.非编码rna的生物学功能（cell. 2019 nov 14; 179(5): 1033–1055.）
rna研究的第一步为rna提取，高质量的rna是进行转录组测序、rt-pcr等试验的基础，然而由于rna单链结构的不稳定性和无处不在的rna酶，使得rna在提取过程中容易发生降解，同时，传统的rna提取方法毒性大，因此，提取出高质量的rna，选择合适的提取产品非常重要！
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对于常规的新鲜或冻存的组织、贴壁细胞、悬浮细胞rna提取，我们molpure® cell/tissue total rna kit 细胞/组织总rna提取试剂盒19221es，适用于10-20 mg动物组织或(1-5)×106个动物细胞的总rna提取纯化。
产品特点rna纯度高：配有基因组dna吸附柱，可有效去除dna污染；
安 全：无需有毒的酚、氯仿等有机物抽提；
快速简便：无需异丙醇或乙醇沉淀操，操作过程30 min完成；
使用方便：全流程室温操作，无需冰浴和低温离心。
产品性能取106个杂交瘤细胞，分别使用19221和trizol（货号：10606es）提取总rna。之后测定浓度和琼脂糖凝胶电泳；同时取2 μl，使用hifair®ⅲ one step rt-qpcr sybr green kit（货号：11143es）进行定量测试小鼠gapdh。结果显示，molpure®cell/tissue rna kit能稳定提取rna，rna产量高，完整度较好。
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图3.一步法反转录定量结果 （注：绿色为 19221，蓝色为 trizol）
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