产品描述
pngase f 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的 n-连接糖,切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖,切割位点为:最内侧的 n-乙酰葡糖胺(glcnac)和天冬酰胺之间。pngase f 还提供不含甘油的形式,便于在 hplc 方法中取得最佳效果。
本公司 pngase 是重组表达,并经多步纯化制备的重组蛋白。
产品特点
➢ 糖蛋白的 n-连接糖的去糖基化
➢ pngase f 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 n-连接糖。
产品活性
活性定义
1 活性单位指在 37℃下, 1×pngase 反应缓冲体系下,60 min 内将 10 µg 变性 rnase b 中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。糖基化rnase b分子量约 17,000 da,去糖基后约13,683 da。
活性测定条件
1× pngase buffer:糖蛋白变性缓冲液(含 0.1% sds,10 mm dtt)、1×glycobuffer 2 缓冲液、1% np-40,37℃反应 1 小时。
糖蛋白于 1×糖蛋白变性缓冲液(含 0.5% sds,40mm dtt)中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性。
产品组成
组成 78bfa10004-15ku 78bfa10004-75ku
pngase 15 ku 75 ku
10×pngase buffer 0.5 ml 1.5 ml
10% np40(10×) 0.5 ml 1.5 ml
10× 糖蛋白变性 buffer 0.5 ml 1.5 ml
酶贮存缓冲液
20 mm tris-hcl,50 mm nacl,5 mm edta,50% glycerol,ph 7.5 @ 25°c
反应缓冲液
10×pngase buffer:500 mm sodium phosphate (ph 7.5 @ 25°c)
其它缓冲液
10×糖蛋白变性缓冲液(glycoprotein denaturing buffer):5% sds,400 mm dtt
10×np-40:10% np-40。
运输与保存
干冰运输,-20℃可保存 2 年,避免反复冻融
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
注意事项
1、已知 pngase f 的活性受 sds 的抑制,所以在反应混合物中必须加入终浓度 1%的 np-40。
2、要使天然糖蛋白去糖基化,建议增加酶量并延长温育时间。
货号 品名 规格 品牌
78bfa10004-15ku 肽n-糖苷酶 f 15ku biohub
78bfa10004-75ku 肽n-糖苷酶 f 75ku biohub
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