使用流式检测细胞凋亡过程介绍
细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡，是由基因控制的主动性细胞死亡过程。越来越多数据发现，细胞凋亡与多种疾病密切相关，如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力，利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿瘤诊断，疗效评价和预后预测提供了重要的参考指标。然而很多实验的同学们，常会碰到上机检测时细胞死亡太多却检测不出凋亡，多次重复结果不一致等现象，接下来就一起看看如何把细胞凋亡的数据变的更加漂亮，准确！
首先，明确一下细胞凋亡和坏死的区别
细胞凋亡(apoptosis) 是一件主动性细胞死亡事件，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控，是细胞为更好地适应环境而主动争取的一种死亡过程。 具体表现为： 出芽形成凋亡小体、核小体间dna的切割，凋亡小体被吞噬和消化等几个连续过程等。
细胞坏死（necrosis） 则是一件被动的过程，是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程，即病理条件下，自体损伤的一种现象。 具体表现为： 细胞胀大，胞膜破裂，细胞内容物外溢，核变化较慢，dna降解不充分，会引起局部严重的炎症反应。
流式检测细胞凋亡的原理
annexin v和pi双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine, ps）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的。
凋亡早期 ps从细胞膜的内侧外翻：该方法简便、快速、准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。因此，将annexin v与pi联合使用时，便可用来鉴别活细胞，凋亡细胞及死亡细胞。
数据分析
annexin v-fitc/pi凋亡检测试剂盒是用fitc标记的annexin v作为探针，fitc最大激发波长为488 nm，最大发射波长525 nm，fitc的绿色荧光在fl1通道检测；pi-dna复合物的最大激发波长为535 nm，最大发射波长为615 nm，pi的红色荧光在fl2或fl3通道检测。通过软件分析，绘制双色散点图，fitc为横坐标，pi为纵坐标。
常见问题解答
1. 如何避免出现假阳性结果？
2. 为什么必须收集细胞上清？
因为凋亡的细胞可能会脱壁，悬浮于培养基，所以必须收集上清再离心取沉淀，合并胰酶消化下来的细胞，不然检测出来的凋亡比例可能会减少。
3. 为什么在染色后1h内就要上机检测？
由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析；pi受时间的影响很大，因标记了pi后会加大细胞毒性，特别是检测早期凋亡时，如果时间延长除了会导致在流式细胞仪上的细胞分群差距加大外，误差会明显加大，所以建议在一个小时内检测。
为什么不能选择铝合金电缆
扬尘检测设备选购要注意这两点
在线露点仪的应用领域和原理
调节水池潜水搅拌机调节潜水深度的方法
CP-50 塑料橡胶裁片机安装操作
使用流式检测细胞凋亡过程介绍
25SU5型美国Fireye控制放大器操作原理
石拐防水电子地磅（丰镇防腐蚀叉车秤）根河隔爆钢瓶秤维修
煤炭化验室对操作实验台等基础设施有哪些要求？
选择滑环时需提供哪些重要的技术参数？
进口品质浙江润鑫道路安全警示灯 国道太阳能爆闪灯
污水处理一体化设备价格
德国Brandenburger BRA-GLA MP系列隔热板技术参数
γ-环糊精，氯代γ-环糊精和三苯基磷的测定
自动化设备配套DRW075-130中研zik紫光减速机制造
GB4610-2008塑料点着温度测试仪（热空气炉法）
药品大抽查中，中药饮片质量安全该如何保障
压力变送器3051GP4A2B21AD4M5K8HR7选型
温室轴流风机运行及降温方法
行业首条光波导玻璃晶圆激光加工智能产线交付！
首先，明确一下细胞凋亡和坏死的区别
细胞凋亡(apoptosis) 是一件主动性细胞死亡事件，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控，是细胞为更好地适应环境而主动争取的一种死亡过程。 具体表现为： 出芽形成凋亡小体、核小体间dna的切割，凋亡小体被吞噬和消化等几个连续过程等。
细胞坏死（necrosis） 则是一件被动的过程，是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程，即病理条件下，自体损伤的一种现象。 具体表现为： 细胞胀大，胞膜破裂，细胞内容物外溢，核变化较慢，dna降解不充分，会引起局部严重的炎症反应。
流式检测细胞凋亡的原理
annexin v和pi双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine, ps）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的。
凋亡早期 ps从细胞膜的内侧外翻：该方法简便、快速、准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。因此，将annexin v与pi联合使用时，便可用来鉴别活细胞，凋亡细胞及死亡细胞。
数据分析
annexin v-fitc/pi凋亡检测试剂盒是用fitc标记的annexin v作为探针，fitc最大激发波长为488 nm，最大发射波长525 nm，fitc的绿色荧光在fl1通道检测；pi-dna复合物的最大激发波长为535 nm，最大发射波长为615 nm，pi的红色荧光在fl2或fl3通道检测。通过软件分析，绘制双色散点图，fitc为横坐标，pi为纵坐标。
常见问题解答
1. 如何避免出现假阳性结果？
2. 为什么必须收集细胞上清？
因为凋亡的细胞可能会脱壁，悬浮于培养基，所以必须收集上清再离心取沉淀，合并胰酶消化下来的细胞，不然检测出来的凋亡比例可能会减少。
3. 为什么在染色后1h内就要上机检测？
由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析；pi受时间的影响很大，因标记了pi后会加大细胞毒性，特别是检测早期凋亡时，如果时间延长除了会导致在流式细胞仪上的细胞分群差距加大外，误差会明显加大，所以建议在一个小时内检测。
为什么不能选择铝合金电缆
扬尘检测设备选购要注意这两点
在线露点仪的应用领域和原理
调节水池潜水搅拌机调节潜水深度的方法
CP-50 塑料橡胶裁片机安装操作
使用流式检测细胞凋亡过程介绍
25SU5型美国Fireye控制放大器操作原理
石拐防水电子地磅（丰镇防腐蚀叉车秤）根河隔爆钢瓶秤维修
煤炭化验室对操作实验台等基础设施有哪些要求？
选择滑环时需提供哪些重要的技术参数？
进口品质浙江润鑫道路安全警示灯 国道太阳能爆闪灯
污水处理一体化设备价格
德国Brandenburger BRA-GLA MP系列隔热板技术参数
γ-环糊精，氯代γ-环糊精和三苯基磷的测定
自动化设备配套DRW075-130中研zik紫光减速机制造
GB4610-2008塑料点着温度测试仪（热空气炉法）
药品大抽查中，中药饮片质量安全该如何保障
压力变送器3051GP4A2B21AD4M5K8HR7选型
温室轴流风机运行及降温方法
行业首条光波导玻璃晶圆激光加工智能产线交付！