双链特异性DNA酶化学性质&使用说明
dsdna酶是一种核酸内切酶，它切割dna中的磷酸二酯键，产生具有5'-磷酸和3'-羟基的寡核苷酸。dsdna酶特异性地消化双链dna（dsdna），而不消化单链dna、引物、探针和rna。dsdna酶是热敏的，在55°c时可快速失活。它主要用于在逆转录实验之前快速去除rna样本中的基因组dna污染。与使用dna酶i去除基因组dna污染的传统方法相比，dsdna酶不需要额外的edta来灭活，减少了rna损伤，节省了实验时间，并确保了rna水平的准确定量。
艾美捷双链特异性dna酶：
cat #: c-bsm0206
size: 50 rxns
storage: -20°c
酶活性定义：
根据kunitz测定方法，在25°c的ph 5.0下，当使用过量的高分子量dna作为底物，酶活性在每分钟260 nm处导致吸光度增加0.001时，酶活性定义为1个单位（u）。
储存缓冲液：
25 mm tris-hcl（ph 7.5，在25°c下）、2.0 mm mgcl2、10 mm nacl、0.01%（v/v）triton x-100、50%（v/v）甘油。
抑制和灭活
抑制作用：金属离子、edta、sds、dtt、β-巯基乙醇、高盐离子浓度等均可抑制
dsdna酶。
灭活：在55°c下培养5分钟。
质量控制
蛋白质纯度
经sds-page和考马斯亮蓝染色测定，酶纯度≥90%。
rna核酸酶活性
将酶与rna底物在37°c下孵育1小时，并进行凝胶电泳以确认rna底物的节点降解。
功能测试
该产品测试了从rna样品中去除基因组dna和随后的rt-qpcr扩增，显示去除率≥99.9%。rna的数量不受dsdna酶处理的影响。
双链特异性dna酶使用说明：
1.在冰上按如下方式制备反应混合物：
2.轻轻拍打并混合反应混合物，然后将混合物在37°c下孵育2-5分钟。
3.在65°c下加热灭活2分钟，并迅速将获得的rna放在冰上进行后续实验。对于长期储存，应在-80°c下储存，避免重复冻融循环
备注
1.如果rna样品的下游应用是rt-pcr，并且靶基因长度≥3kb，则在灭活步骤之前添加最终浓度为10mm的dtt。
2.为了防止rna降解，在反应混合物中加入适量的rnase抑制剂。
该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。
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2.为了防止rna降解，在反应混合物中加入适量的rnase抑制剂。
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