噬菌体对发酵的影响
噬菌体的感染力非常强,易感染用于发酵的细菌和放线菌。噬菌体感染的传播蔓延速度非常快,且很难防治,对发酵生产带来巨大的威胁。发酵过程如果受噬菌体侵染,般会发生溶菌,随之出现发酵迟缓或停止,而且受噬菌体感染后,往往会反复连续感染,使生产无法进行,甚至倒灌。
噬菌体感染的具体表现为:
①镜检可发现菌体数量明显减少,菌体不规则,严重时看不到菌体,且是在短时间内菌体自溶。发酵液光密度(od值)不上升,甚至回降。
②发酵液ph值逐渐上升,4~8h内可达8.0以上,不再下降。
③糖耗、温升缓慢或停止,发酵液残糖量高,产生大量泡沫,使发酵液呈黏胶状。
④发酵周期延长,产物生成量甚少或增长缓慢,甚至停止。
产生噬菌体污染的原因
环境污染噬菌体是造成噬菌体感染的主要根源。通常在工厂投产初期并不会感觉到噬菌体的危害,经过1~2年以后,主要是由于生产和试验过程中不断不加注意地把许多活菌体排放到周围环境中去,自然界中的噬菌体就在活菌体中大量生长,为自然界中噬菌体快速增殖提供了良好条件。这些噬菌体随着风沙尘土、空气流动、人们的走动、车辆的往来到处传播,使噬菌体有可能潜入生产的各个环节,尤其是通过空气系统进入种子室、种子罐、发酵罐。
噬菌体污染的检测
要判断发酵过程有无感染噬菌体,根本的方法是做噬菌斑检验。在无菌培养皿上倒入培养生产菌的灭菌培养基(加琼脂)作下层。同样地,培养基中加入20%~30%培养好的种子液,再加入待测发酵液,摇匀后,铺上层。培养12~20h后观察培养皿上是否出现噬菌斑。
也可以在上层培养基中只加种子液,而将待测发酵液直接点种在上层培养基表面,培养后观察有无透明圈出现。
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