技术快报：On-chip分选流式对非小细胞肺癌患者CTC细胞分析和分离研究
非小细胞肺癌（nonsmall‐cell lung carcinomas，nsclc）约占所有肺癌的80%，并且大多数患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。对于nsclc，靶向治疗是临床上一种理想的治疗方式。表皮生长因子受体（epidermal growthfactor receptor，egfr）是目前治疗nsclc的一个重要靶点，然而相关靶点药物如egfr激酶抑制剂有可能导致肿瘤细胞的耐药性突变。因此，实时监测突变在治疗过程中十分必要。传统活检方法无法用于实时监测，而可视作肿瘤组织替代品的循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，ctc）有着实现实时监测的潜力。
关于ctc细胞检测，cellsearch系统是的美国 fda批准的ctc计数系统，但是它仍然难以用于nsclc患者ctc的分析。近日，日本科学家借助on-chip sort流式分选仪在cancer science杂志上发表了有关nsclc患者ctc细胞检测的文献《isolation and molecular analysisof circulating tumor cells from lung cancer patients using a microfluidic chiptype cell sorter》。研究认为，使用on-chip sort是检测和捕获nsclc患者ctc细胞的有效方法。
首先，研究人员将不同数量的各种肿瘤细胞系混合掺入血液中，并使用on-chip sort检测并分离ctc细胞。分离得到ctc细胞中，egfr突变的检测成功率为100％。之后，研究人员采集了30个nsclc患者的外周血，并使用on-chip sort和cellsearch以盲目的方式计算ctc细胞数量。结果显示，30名患者中有22名（73.3％）患者使用on-chip sort确定为ctc阳性，但只有9名（30％）使用cellsearch系统确定为ctc阳性。并且对这9例cellsearch确认为阳性的患者，on-chip sort也确认为阳性。说明在nsclc患者ctc细胞检测中，on-chip sort比cellsearch系统有更高的灵敏度，一些无法通过cellsearch检测到的ctc细胞可以使用on-chip sort检测到。
此外，研究人员使用荧光显微镜观察了on-chip sort分选捕获的细胞（这些细胞在分选之前已经标记了靶向肿瘤细胞标志物的荧光抗体 ）。结果显示，分选得到的细胞与肿瘤标志物荧光抗体结合，说明分选得到的是ctc细胞。
总结：
on-chip sort可以准确分离捕获nsclc患者的ctc细胞，且可用于后续的肿瘤细胞dna检测，以实现egfr突变的实时监测。此外，基于on-chip sort的ctc细胞分析方法在细胞形态学分析、免疫细胞化学、荧光原位杂交检测等方面提供了的优势。最重要的是，此方法可用于评估egfr蛋白表达水平的变化，在nsclc患者ctc细胞诊断方面有着很大的临床潜力。
关于on-chip sort流式分选仪
技术革新
● 创新：采用微流控技术；
● 无损伤：低压气体推动分选；
● ：一次性芯片全封闭，无临床污染；
● 无限制：分选时对鞘液没有要求（可使用海水、培养液、油等）；
应用领域
●ctc分选与鉴定；
● 神经细胞分选与鉴定；
● 细菌、微生物、霉菌分选与活力测定；
● 精子分选；
● 血细胞分选与鉴定；
● 干细胞研究（ipses细胞）；
● 药物机理研究；
●……
※获得诺贝尔医学奖的京都大学ips研究院等多数客户在使用
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