而hepes作为一种不易穿过生物膜的缓冲对,可以在稳定脂质体外水相ph为弱碱性的同时,不改变内水相酸性ph,非常适用于伊立替康脂质体。
上述内外水相ph差异的问题,在ema审评报告讨论部分也有体现。ema审评报告中提到,伊立替康脂质体药物开发的重点是:
选择用于活性药物负载的最佳抗衡离子
选择 dspc 与脂质膜的胆固醇成分的最佳比例,这会影响其物理性质和保留活性物质的能力在脂质体中
选择脂质体双层的 mpeg-2000-dspe 组分,其存在于表面提供空间屏障以避免脂质体聚集
选择能够保持最佳ph范围的适当缓冲液输液用浓缩液
将缓冲液的选择单列一条,可见其对伊立替康脂质体制剂的重要程度。
图1伊立替康脂质体示意图
图2不同外水相ph下伊立替康脂质体长期储存下溶血-pc的含量变化(样品6为ph7.25,样品1为ph6.5)
五、hepes相较于其他缓冲体系较为突出的特点
pka随温度变化非常小,buffer的ph值随温度漂移很小。
性质稳定,hepes不会与其他离子发生相互作用,一方面hepes不会与其他离子发生络合影响其他离子功能,另外一方面其他离子的存在不会影响hepes的缓冲能力。
细胞培养基中ph的维持主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的co2共同维持,当细胞处于开放环境时,co2逸散会导致ph快速上升脱离生理ph范围,而添加hepes缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
hepes不易穿过生物膜,不干扰细胞内的生化反应。
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不易穿过脂质膜的HEPES更适用于伊立替康脂质体
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