实现更准确定量,荧光定量PCR仪指数期测量更*

基本pcr运行可以分为三个阶段:指数期、线性期和平台期,荧光定量pcr仪主要是在发生pcr扩增时进行测量。一般为定量,因为在pcr的指数(对数)期内采集数据,在此期间pcr产物的数量与核酸模板的量成正比。
荧光定量pcr仪的应用十分广泛,可以进行基因表达定量、芯片验证、病原体检测、snp基因分型、拷贝数变异、microrna分析、病毒定量、sirna/rnai实验多种方向的研究测量。
1、提高检测的动态范围
2、无需pcr后处理
3、检测能够覆盖低至2倍的变化
4、在pcr的指数期内采集数据
5、报告基团荧光信号的增加与生成的扩增子数量成正比
6、裂解探针提供扩增子的裂解记录
荧光定量pcr仪集中于指数期,因为它可提供更加精确的数据进行定量。在指数期内,实时计算两个数值。阈值线是反应的荧光强度超过背景时的检测水平。样品达到此水平的pcr循环称为循环阈值(ct)。ct值用于下游定量或存在/缺失检测。通过比较未知浓度的样品与一系列标准品的ct值,可以精确测定未知反应中的模板dna数量。
关键词:芯片

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