脑缺血再灌注模型和全脑缺血动物模型(图文详解)
1 mcao模型制备
术前准备见左图,选择220-250g的sd大鼠,10%水合氯醛(300ul/100g)麻醉保定,仰卧位,颈部正中剃毛消毒备用(右图)
剪开颈部皮肤,钝性分离颈部肌肉,暴露并游离单侧颈动脉,穿线备用。
动脉夹暂时夹闭主动脉,并结扎颈外动脉。主动脉用注射器针头挑开小口,插入自制线栓到颈内动脉,大约2.5-3cm。结扎颈内动脉,结扎主动脉近心端,松开动脉夹。
逐层缝合,根据实验的需要的缺血时间进行拔栓手术(再灌注),拔栓时动物要麻醉,把出线栓的长度约为0.5cm。
2 cva模型制备
全脑缺血常用的方法是四动脉阻断法(occlusion of four blood vessels)
sd大鼠,10%水合氯醛(300ul/100g)麻醉保定,俯卧卧位,颈部正中剃毛消毒备用。剥离皮肤和肌肉,暴露颈椎横突翼,找到左右两侧横突孔。
将灼热的电烙铁尖头直接插入翼突孔,电凝双侧椎动脉造成性闭塞,避免损伤脊髓和脑干。
逐层缝合枕部皮肤,并消毒。
之后,仰卧位消毒备用,游离双侧颈总动脉,留线备用,动脉夹夹闭双侧颈总动脉15-30分钟,松开动脉夹,逐层缝合,手术完成。
3 模型成功的评判方法
神经功能缺损(nds)评分
0分:活动基本正常,无明显学症状;
1分:左侧前爪无法伸展;
2分:爬行时向左侧转圈;
3分:行走时向偏瘫侧倾倒;
4分:不能自动行走,有意识障碍
5分:死亡
水迷宫实验
morris水迷宫(morris water maze, mwm)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。(左图正常,右图模型)
ttc染色
ttc染色是常用来评价脑缺血损伤的指标,缺血区域会呈白色。(从左到右依次为正常;mcao模型;cav模型)
he染色
一般发生缺血损伤的脑组织的神经元细胞会受到明显损伤(上侧正常,下侧损伤)
tunel染色
发生损伤的脑组织,tunel染色的细胞会明显增多。
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