mmp2/mmp9明胶酶谱法elisa试剂盒细胞样本应该如何处理:
细胞样本用pbs,5倍体积震荡裂解,估算细胞的体积,然后加入5倍体积的pbs,涡旋振荡15-30s,而后静置或低速离心。或者手动震荡。
mmp2/mmp9明胶酶谱法试剂盒采用酶谱法(zymography)检测mmp-2、mmp-9 活性。zymography 是一种广为使用的、基于sds-page 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1 nm,高于elisa方法,其基本原理和程序是:制备加有胶原酶底物的sds-page 凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳,电泳结束后取出凝胶与酶反应buffer 孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,从而能同时指示mmp-2、mmp-9 的大小位置(酶谱)及活性。本试剂盒提供mmp-2、mmp-9 特异蛋白底物及酶学反应缓冲液,可检测少至0.1~0.5 μl 血液中的mmp-2、mmp-9 酶谱及活性,检测灵敏度~1nm。试剂盒可进行50次标准小胶检测,如果小胶加样孔为10~15个,则总计可检测500~750个样品。
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