67NR细胞 复苏细胞培养步骤
细胞：67nr细胞
中文名称：小鼠乳腺癌细胞
生长特性：贴壁细胞
培养基：1640培养基（gibco） 血清：10% 胎牛血清（gibco）
细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）
1． 吸出原培养瓶中的培养基，pbs 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）
2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4． 注意培养基 ph 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
特别注意：（信息针对网络宣传，仅供参考；建议直接咨询细胞管理员）
1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）
2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。
成年生物体内有多种体细胞，例如血液细胞、肌肉细胞、免疫细胞和神经细胞等等，它们形态各异，具有不同的功能。干细胞则是未成熟的细胞，可发育成为体细胞。
如果把体细胞比喻成具有一技之长的“专门人才”。
干细胞：可以通过学习发展成才的“潜在人才”，可以分化成体细胞。分化一旦完成，体细胞的“职业”就确定了。
胚胎干细胞:具有广泛的发展潜力，可以分化成所有不同种类的体细胞。就像刚出生的婴儿，虽然没有任何专门才能，但未来有着无限的可能，长大后具体成为什么领域的人才取决于培养过程。
由于胚胎干细胞是“全功能”的干细胞，仅从技术角度来说，用胚胎干细胞来培养人体组织和器官以治疗疾病是理想的。但胚胎干细胞要从胚胎中提取，因此进行得不太顺利。
成年动物体内也拥有一些干细胞，称为成体干细胞。它们具有一定的分化潜力，但分化方向比较固定，比如造血干细胞通常只发展成血液细胞。成体干细胞就像已经接受过大量专业训练的学生，一般只会发展成特定领域的人才。
成体干细胞其分化能力有限。虽然曾成功改变成体干细胞的分化方向，但总的来说，“跨专业发展”对成体干细胞是相当困难的。
以往认为，细胞的克隆潜力与其分化潜力有关，胚胎干细胞克隆潜力最高，体细胞低，而成体干细胞介乎两者中间。用分化的体细胞克隆出小鼠，同时也证明了体细胞克隆潜力比成体干细胞更高，这一成果对于克隆和干细胞研究有重要意义。
关键词：培养箱
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1． 吸出原培养瓶中的培养基，pbs 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）
2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4． 注意培养基 ph 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
特别注意：（信息针对网络宣传，仅供参考；建议直接咨询细胞管理员）
1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）
2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。
成年生物体内有多种体细胞，例如血液细胞、肌肉细胞、免疫细胞和神经细胞等等，它们形态各异，具有不同的功能。干细胞则是未成熟的细胞，可发育成为体细胞。
如果把体细胞比喻成具有一技之长的“专门人才”。
干细胞：可以通过学习发展成才的“潜在人才”，可以分化成体细胞。分化一旦完成，体细胞的“职业”就确定了。
胚胎干细胞:具有广泛的发展潜力，可以分化成所有不同种类的体细胞。就像刚出生的婴儿，虽然没有任何专门才能，但未来有着无限的可能，长大后具体成为什么领域的人才取决于培养过程。
由于胚胎干细胞是“全功能”的干细胞，仅从技术角度来说，用胚胎干细胞来培养人体组织和器官以治疗疾病是理想的。但胚胎干细胞要从胚胎中提取，因此进行得不太顺利。
成年动物体内也拥有一些干细胞，称为成体干细胞。它们具有一定的分化潜力，但分化方向比较固定，比如造血干细胞通常只发展成血液细胞。成体干细胞就像已经接受过大量专业训练的学生，一般只会发展成特定领域的人才。
成体干细胞其分化能力有限。虽然曾成功改变成体干细胞的分化方向，但总的来说，“跨专业发展”对成体干细胞是相当困难的。
以往认为，细胞的克隆潜力与其分化潜力有关，胚胎干细胞克隆潜力最高，体细胞低，而成体干细胞介乎两者中间。用分化的体细胞克隆出小鼠，同时也证明了体细胞克隆潜力比成体干细胞更高，这一成果对于克隆和干细胞研究有重要意义。
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