转染技术新宠-阳离子聚合物基因转染技术
适用宿主广泛,操作简便,细胞毒性小,转染率高。其中聚乙烯亚胺(pei)的转染性能比较好。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔两个碳原子,就是第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何ph下都能充当有效的“质子海绵”体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞,其效果好于脂质聚酰胺,而且细胞毒性低。大量实验证明,pei是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时,pei经常做为核心组成成分。
线性聚乙烯亚胺(line pei)转染复合物的细胞毒性低,有利于细胞定位,而且转染率*。
polyscience公司的两款明星产品线性聚乙烯亚胺(23966-1和24765-1)近年来越来越多的受到研究者们的青睐。其产品被运用到大量的转染实验中,也出现在大量的文献中。
polyscience公司成立于1961年,总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿,是一家生产研发化学产品的公司。该公司的产品种类已经累计超过3000种,其产品的特点是体积小,附加值高。
公司产品主要包含:
单体和聚合物微球和粒子(有机、无机、可生物降解、磁珠、荧光素、染料、特异性抗体和蛋白包被颗粒,直径从40nm到10mm)用于核酸提取、蛋白分离和纯化等。高性能粘合剂、涂料和密封剂23966-1
polyethylenimine, linear,mw 25000,transfection grade (pei 25k)
化学性质:
casno.
9002-98-6,26913-06-4
分子式
(ch2ch2nh)n
分子量
25,000
熔点
73-75º
溶解度
solublein:hotwater,coldwateratlowph,methanol,andethanol.
insolublein:benzene,ethyletherandacetone
appearance
whitetoyellowsolid
24765-1(更高效的pei聚乙烯亚胺聚合物转染试剂)
pei max-transfection grade linear polyethylenimine hydrochloride (mw40,000)
基本描述:
polyethyleniminehclmax,linear,mw40,000(pei40,000)是热卖产品线性化聚乙烯亚胺pei25,000的升级产品,不同之处在于1)*水解(去乙酰化);2)pei25,000的盐酸盐形式,具更高的水溶特性;3)含更长连续性乙烯亚胺(ethyleneimine)片段,其质子化氮水平比pei25,000提高11%以上。本品经碱中和后,可转化为线性化自由胺(pei),此时分子量正相当于25,000。
thomasm,etal(2005)研究数据表明,去乙酰化的pei40,000(polyethyleniminemax40,000)体外质粒dna转染效率提高21倍,小鼠体内靶向效率达到10,000倍,随之肺部特异疗效显示增强1500倍。
化学性质:
casno.
9002-98-6,26913-06-4
molecularweight
40,000(~22,000freebase)
solubility
solublein:coldandroomtemperaturewater
insolublein:commonorganicsolvents(ethanol,acetone,tetrahydrofuran)
appearance
whitetooff-whitefreeflowingsolid
使用方法(仅供参考)
1.pour ~450 ml of milli-q h2o into a 500-ml glass beaker.
2.add 500 mg of pei to the beaker with stirring.
3.add concentrated hcl drop-wise to the solution to ph <2.0.
4.stir until the pei is dissolved (~2-3 h). maintain the ph <2.0 throughout.
approximately 800 μl of 12 m hcl will be required for full pei dissolution. there may still be some small fiber particles that will not dissolve.
5.add concentrated naoh drop-wise to the solution to ph 7.0.
approximately 500 μl of 10 m naoh will be required to neutralize the pei solution.
6.pour the solution into a 500-ml glass cylinder. adjust the final volume to 500 ml with milli-q h2o.
7.filter-sterilize the solution through a 0.22-μm membrane.
8.store aliquots of the desired volume at -20°c.
80190-380-02-R
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