柱前衍生及柱后衍生法
关于检测方法✦
gb 5009.240-2023 食品安全国家标准 食品中伏马菌素的测定 （将于2024年3月实施）
ls/t 6130-2017 粮油检验 粮食中伏马毒素b1、b2的测定 超高效液相色谱法
iac-107伏马毒素免疫亲和柱能够特异性的纯化与浓缩样品中的伏马毒素b1 、b2 、b3 . 伏马毒素免疫亲和柱广泛地应用于粮食、食品、饲料、等样品的提取，该方法速度快、操作简单、准确性高，对准确灵敏的测定样品中的伏马毒素起到重要的作用。
✦ 操作流程✦
一、样品前处理
1.样品提取及稀释
1.1 称取25.0g(精确到0.1g)过筛样品于均质杯中,加入乙腈水(5+5) 100ml，以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取20min,定量滤纸过滤。
1.2 移取2.0mi滤液加入48ml0.1%的吐温/pbs稀释混匀。
2.样品净化
2.1将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下准确移取50.0ml上述样品溶液注入玻璃注射器中。
2.2将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至空气进入亲和柱中。
2.3用10ml水淋洗亲和柱流速为1滴/s~2滴/s.直至空气进入亲和柱中,弃去全部流出液，抽干小柱。
2.4准确加入3ml甲醇-乙酸溶液( 98+2 洗脱流速约为1滴/s,收集洗脱液。50°c下氮气浓缩吹干后，用乙腈水 (5+5) 定容至1 ml，待检测。
二、液相条件及衍生方法
柱前衍生法
色谱柱: cloversil-c18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流动相: 甲醇:0.1mnah2po4(77: 23 体积比)用磷酸将ph值调到3.3
检测器: 激发波长335nm 发射波长440nm
进样体积: 20ul
衍生方法：取100ul标准溶液或样品净化液于进样瓶中加入100ul opa衍生试剂a涡旋混合30s，在 2分钟内进样分析。
柱后衍生法
色谱柱: cloversil-c18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流动相: 甲醇/(65+35)
检测器:激发波长335nm发射波长440mm
进样体积: 20ul
衍生泵流速: 0.4ml/min
衍生温度: 50℃
衍生泵流动相: opa行生试剂b
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一、样品前处理
1.样品提取及稀释
1.1 称取25.0g(精确到0.1g)过筛样品于均质杯中,加入乙腈水(5+5) 100ml，以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取20min,定量滤纸过滤。
1.2 移取2.0mi滤液加入48ml0.1%的吐温/pbs稀释混匀。
2.样品净化
2.1将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下准确移取50.0ml上述样品溶液注入玻璃注射器中。
2.2将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至空气进入亲和柱中。
2.3用10ml水淋洗亲和柱流速为1滴/s~2滴/s.直至空气进入亲和柱中,弃去全部流出液，抽干小柱。
2.4准确加入3ml甲醇-乙酸溶液( 98+2 洗脱流速约为1滴/s,收集洗脱液。50°c下氮气浓缩吹干后，用乙腈水 (5+5) 定容至1 ml，待检测。
二、液相条件及衍生方法
柱前衍生法
色谱柱: cloversil-c18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流动相: 甲醇:0.1mnah2po4(77: 23 体积比)用磷酸将ph值调到3.3
检测器: 激发波长335nm 发射波长440nm
进样体积: 20ul
衍生方法：取100ul标准溶液或样品净化液于进样瓶中加入100ul opa衍生试剂a涡旋混合30s，在 2分钟内进样分析。
柱后衍生法
色谱柱: cloversil-c18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流动相: 甲醇/(65+35)
检测器:激发波长335nm发射波长440mm
进样体积: 20ul
衍生泵流速: 0.4ml/min
衍生温度: 50℃
衍生泵流动相: opa行生试剂b
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