人小细胞肺癌细胞(H1688细胞培养)

细胞:h1688细胞
中文名称:人小细胞肺癌细胞
生长特性:贴壁细胞
来源:atcc细胞库
培养基:1640培养基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,pbs 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 ph 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
(adv)核酸扩增检测:
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10,000rpm离心10s,向设定的n个pcr反应管中分别加入26μl,向每管中加入处理后样品(所获得的cdna样品)或adv–阳性质控品(使用前用阴性质控品梯度稀释10倍、100倍、1000倍,记为1×10p6pcopies/ml,1×10p5pcopies/ml,1×10p4pcopies/ml)和阴性质控品4μl,10,000rpm瞬时离心30秒。将各反应管放入定量pcr仪器的反应槽内,按对应顺序设置阴性控品,阳性定量标准品以及未知标本,并设置反应体积(30μl)、样品名称、标记荧光基团种类(报告基团为fam,淬灭基团为tamra)和循环条件:
abi prism 7700,abi prism5700,abi geneamp 7000 (需要剪掉反应盖),abi prism7300/7500(使用8联管),mj opticon(使用8联管)等使用薄壁管的仪器,循环条件:94℃→2分钟,后93℃ 30秒→55℃ 45秒, 40个循环。
lightcycler等使用毛细管的仪器,循环条件:94℃→2分钟,后93℃ 5秒→56℃ 45秒,共40个循环。
结果分析判定:
反应结束后保存检测数据文件。根据分析后图像调节baseline的start值(3-8),stop值(13-18)以及threshold值,使std curve 窗口下的标准曲线达到最佳(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值),最后到reporter窗口下记录仪器自动分析计算出的未知标本数值(qty-copies/ml)。
关键词:培养箱

湖南粮食谷物重金属镉快速检测仪生产厂家
微量自动排气阀等项目获“浙江制造”标准立项
分享15吨餐厨垃圾处理设备的使用要点
橡塑绝热保温材料的特点
多功能餐馆餐饮垃圾一体化机联系电话
人小细胞肺癌细胞(H1688细胞培养)
工业型陶瓷全纤维台车炉各个部件的主要功能
宝山区地磅-《80吨地磅》出租/销售/维修
技术文献:气相渗透提高钙钛矿太阳能电池中有机层的热稳定性
如何选购水槽?
电动单座调节阀自力式调节阀性能参数
使用Agilent 7800 ICP-MS 实现海水的高通量直接分析
常见的雨水收集利用的方式有哪些
Elcometer108拉拔式附着力仪操作指南
全自动纯净水生产线都有哪些配置!
与同方量的耐火材料搅拌机相比,行星式搅拌机更适用于行业生产线的布局
旋转堰门在水利工程中的安全问题及应对措施
使用微生物实验室离心机时需要平衡样品和试管
白塔紫外杀菌机功能
橡塑保温板厂家现货零售仓库