CRISPR基因激活技术,有力揭示干细胞分化过程中的关键机理

日前,来自杜克大学等机构的科学家,开发了一种新方法能将干细胞转化成为想要的细胞类型。这篇论文名为“master regulators and cofactors of human neuronal cell fate specification identified by crispr gene activation screens”,刊登在cell reports上。
利用crispr基因编辑技术,研究人员识别出哪些转录因子,可用于制造成熟的成体神经元。其实早在2016年,研究者black等人就报道了一种方法,用以 crispr为基础的基因激活子来开启基因网络的表达,从而将成纤维细胞转化成为神经元细胞。
研究人员先从多能干细胞开始,对其进行工程化修饰,一旦变为神经元细胞,就会发出红色荧光。荧光越亮,分化为神经元的命运就越强。
随后研究人员制备出一个导向rna文库,这些rna针对的是所有转录因子的基因。研究人员向干细胞中引入了crispr基因激活剂和导向rna文库以便每一种细胞仅能够接收一种单一的导向rna,从而开启特定的基因靶点,随后研究人员根据细胞变红的程度进行分类,并对红和不红细胞中的rnas进行测序,这即能揭示出哪些基因在开启后对促进分化为神经元有益。研究者还揭示出拮抗干细胞分化神经元的因子。
从干细胞转化为成熟神经元细胞的过程需要7天时间,大大缩短了时间周期,为帮助加速治疗神经系统疾病和开发新型检测技术,提供了很多帮助。
总之,基于crispr的基因激活技术对研究人类干细胞转化为具体类型细胞,提供了有力的研究工具。
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