指南 | Lonza 电转条件优化指南及常见问题
本期我们将为您提供优化 4d-nucleofector™ x 单元的 nucleofection™ 条件的指南，及有关该主题的常见问题。
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nucleofector™ i 或 ii 条件是否与 4d-nucleofector™ x 单元兼容？
4d-nucleofector™ 系统基于升级后的 nucleofector™ 技术，并具有以下主要改进：
两种 nucleofection™ 体系(20ul和100ul)，且实验条件可以互相转移
nucleocuvette™ 由导电聚合物而非铝组成，提高了细胞活力
简化的 4d-nucleofector™ 试剂
更广泛的程序来微调您的优化
由于这些差异，为 nucleofector™ i 或 ii 设备推荐的解决方案对 4d-nucleofector™ 系统无效。然而，在 4d-nucleofector™ x 单元上运行优化是一个潜在改善 nucleofection™ 结果的佳机会。
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我可以优化哪些参数？
在 nucleofection™ 优化中，最重要的参数是 nucleofector™ 试剂和程序。
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我应该使用什么底物进行优化？
无论您感兴趣的底物（质粒、sirna、蛋白质或化合物）如何，我们始终建议使用我们的 pmaxgfp™ 载体进行优化。使用 pmaxgfp™ vector 进行优化消除了许多变量，例如底物制备的性质和质量以及分析时间。
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我应该以什么 nucleofection™ 体系进行优化？
4d-nucleofector™ x 单元旨在简化优化步骤。我们建议使用 20 μl nucleocuvette™ strips 进行优化，减少珍贵细胞的消耗。确定最佳条件后，您可以使用相同的方案，通过将细胞数量和底物数量乘以 5 来简单地切换到 100 μl nucleocuvette™。
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如何优化 4d-nucleofector™ x 单元上的 nucleofection™ 条件？
首先我们将访问lonza 开放的数据库，查找相关程序及方案。
当您的细胞没有推荐的方案时，将适用以下三种情况之一：
如果没有任何可用的建议，则开始第一轮优化。几种 nucleofector™ 试剂（原代细胞的 p1 至 p5 和细胞系的 se、sf 和 sg）中的每一种都将使用 15 个不同的程序进行测试。
遵循基本的 4d-nucleofector™ x 单元方案（如果有）。使用少量的程序 (6–7个) 测试一个或两个 nucleofector™ 试剂。
数据库描述了 4d-nucleofector™ x 单元的 nucleofection™ 条件和数据。您可以选择测试它们或返回前两个选项之一。
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如何进一步改善我的 nucleofection™ 条件？
一旦从第一轮优化中获得 nucleofection™ 的结果，您可以使用我们基于 web 的优化表格请求我们的反馈，
参考下方的优化策略，可能会改善您的 nucleofection™ 结果：
在表格中选择效果好的初始程序（例如 dn-100）。表格中间垂直列出的是第一轮优化中描述的 15 个程序。
使用所选程序左侧的程序来提高细胞活力（例如 dh-100）。使用右侧的程序来提高转染效率（例如 er-100）
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两种 nucleofection™ 体系(20ul和100ul)，且实验条件可以互相转移
nucleocuvette™ 由导电聚合物而非铝组成，提高了细胞活力
简化的 4d-nucleofector™ 试剂
更广泛的程序来微调您的优化
由于这些差异，为 nucleofector™ i 或 ii 设备推荐的解决方案对 4d-nucleofector™ 系统无效。然而，在 4d-nucleofector™ x 单元上运行优化是一个潜在改善 nucleofection™ 结果的佳机会。
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我可以优化哪些参数？
在 nucleofection™ 优化中，最重要的参数是 nucleofector™ 试剂和程序。
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我应该使用什么底物进行优化？
无论您感兴趣的底物（质粒、sirna、蛋白质或化合物）如何，我们始终建议使用我们的 pmaxgfp™ 载体进行优化。使用 pmaxgfp™ vector 进行优化消除了许多变量，例如底物制备的性质和质量以及分析时间。
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我应该以什么 nucleofection™ 体系进行优化？
4d-nucleofector™ x 单元旨在简化优化步骤。我们建议使用 20 μl nucleocuvette™ strips 进行优化，减少珍贵细胞的消耗。确定最佳条件后，您可以使用相同的方案，通过将细胞数量和底物数量乘以 5 来简单地切换到 100 μl nucleocuvette™。
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如何优化 4d-nucleofector™ x 单元上的 nucleofection™ 条件？
首先我们将访问lonza 开放的数据库，查找相关程序及方案。
当您的细胞没有推荐的方案时，将适用以下三种情况之一：
如果没有任何可用的建议，则开始第一轮优化。几种 nucleofector™ 试剂（原代细胞的 p1 至 p5 和细胞系的 se、sf 和 sg）中的每一种都将使用 15 个不同的程序进行测试。
遵循基本的 4d-nucleofector™ x 单元方案（如果有）。使用少量的程序 (6–7个) 测试一个或两个 nucleofector™ 试剂。
数据库描述了 4d-nucleofector™ x 单元的 nucleofection™ 条件和数据。您可以选择测试它们或返回前两个选项之一。
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如何进一步改善我的 nucleofection™ 条件？
一旦从第一轮优化中获得 nucleofection™ 的结果，您可以使用我们基于 web 的优化表格请求我们的反馈，
参考下方的优化策略，可能会改善您的 nucleofection™ 结果：
在表格中选择效果好的初始程序（例如 dn-100）。表格中间垂直列出的是第一轮优化中描述的 15 个程序。
使用所选程序左侧的程序来提高细胞活力（例如 dh-100）。使用右侧的程序来提高转染效率（例如 er-100）
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