危险的耐药致命菌—粘菌素耐药菌

粘菌素(colistin)又称多粘菌素,属于抗革兰氏阴性菌药物的一种,临床上主要用于治疗革兰阴性菌感染,特别是绿脓杆菌和大肠杆菌引起的各种感染,如呼吸系统感染、腹膜炎、胆管感染、尿路感染、烧伤感染、眼角膜感染及败血症等。
粘菌素存在副作用,包括肾毒性和耳毒性(1,2)。国内外科研人员对粘菌素进行了更广泛更深入的研究。例如,中国鉴定了由mcr-1 petn基因引起的质粒介导的粘菌素(col)耐受(3)。而近的临床数据还表明,如果采取某些预防措施,粘菌素的使用是可以被接受的(4)。
《抗菌药物临床应用指导原则(2015年版)》中指出,近年来,多重耐药革兰氏阴性菌日益增加,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌、多重耐药铜绿假单胞菌等对多粘菌素类药物耐药率低,因此多粘菌素药物重新成为被选用的药物之一。
粘菌素对铜绿假单胞菌的抗菌作用为显著,对大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌、流感杆菌、产气杆菌及肺炎杆菌等也有良好的作用。但随着抗生素的滥用,耐粘菌素的细菌被不断发现并报道,其在世界范围内蔓延并引起人类感染甚至死亡。
在临床或试验中,分离检测粘菌素耐药菌需要使用粘菌素耐药菌显色培养基。himedia公司生产的粘菌素耐药菌显色培养基(货号:m2094,品名:hicrome™ colistin resistant agar base)特异性高、灵敏度高,用于快速分离、鉴定革兰氏阴性粘菌素耐药菌。而且,经分离后的菌种还可用作后续进一步试验。
m2094中的酸水解酪蛋白提供氮源和碳源化合物、长链氨基酸、硫和其他必需营养素。显色混合物有助于颜色鉴别。
加入添加剂fd355,35-37℃培育18-24小时后,显色底物被粘菌素抗性大肠杆菌产生的β-d-半乳糖苷酶特异性裂解,产生粉红色至紫色的菌落。粘菌素抗性肺炎克雷伯菌裂解另一种显色底物,产生金属蓝色的菌落。假单胞菌产生的无色菌落可能含有轻微的绿色的色素。来自蛋白胨的苯*和*有助于检测*脱氨酶活性,指示变形杆菌、摩根菌和普罗维登西的存在,它们菌落呈现褐色。
其中耐粘菌素大肠杆菌、耐粘菌素肺炎克雷伯菌、耐粘菌素铜绿假单胞菌接种量为50-100cfu,在培养基上旺盛生长且回收率≥50%.粘菌素敏感的革兰氏阴性菌和*接种量为103cfu,在培养基上生长受抑制且回收率为0%.
图1:hicrome粘菌素耐药菌显色培养基
m2094被用作筛选培养基,符合欧盟体外诊断医疗器械注册资格(欧盟ivdd),分离后的菌株应遵循《美国临床和实验室标准协会》(clsi)指南,进一步检测分离菌株对粘菌素的敏感性。
参考文献
1. cheng yh, lin tl, pan yj, wang yp, lin yt, wang jt.2015. colistin resistance mechanisms in klebsiella pneumoniae strains from taiwan. antimicrob agents chemother 59:2909–2913. doi:10.1128/aac.04763-14.
2. lim lm, ly n, anderson d, yang jc, macander l, jarkowski a, forrest a, bulitta jb, tsuji bt.2010. resurgence of colistin: a review of resistance, toxicity, pharmacodynamics, and dosing. pharmacotherapy 30:1279–1291. doi:10.1592/phco.30.12.1279.
3. liu yy, wang y, walsh tr, yi lx, zhang retal. emergence of plasmid-mediated colistin resistance mechanism mcr-1 in animals and human beings in china: a microbiological and molecular biological study. lancet infect dis 2016;16
4. falagas me, rafilidis pi.2009. nephrotoxicity of colistin: new insight into an old antibiotic. clin.infect. dis. 48:1729-1721.
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