Picoplex：植入前基因筛查诊断单细胞文库构建技术
微阵列（arrays）分析是zui广泛使用的pgs技术。picoplex全基因组扩增技术已经成为pgs的标准扩增技术。
植入前基因筛查和诊断（pgs，pgd）指体外受精（ivf）过程中所做的胚胎或卵母细胞测试，以便选择没有染色体变异或带有家族遗传疾病等位基因的胚胎，提高怀孕成功率，降低特定遗传病的传递风险。微阵列分析是ivf机构zui常用的pgs技术，应用picoplex技术的好几种试剂盒被广泛使用。包括illumina’s 24sure 微阵列（原 bluegnome’s 24sure）, perkin elmer’skaryolite bobs developed for pgs和oxford gene technology’scytosure™微阵列。不过实验室研究趋向是使用低深度的新一代测序（ngs）替代微阵列，picoplex dna-seq正好满足这种需求。
植入前基因筛查诊断流程
首先从受精卵吸取一个极体或者从受精后第三天的5到10个胚胎细胞吸取单细胞。裂解细胞后，释放出来的dna进行扩增，所得产物标记后与含有目标基因组的微阵列杂交。分析软件会识别出拷贝数变异。具有高稳定性和可再现性，picoplex全基因组扩增技术已经成为pgs的标准扩增技术。这一技术也适用任何单细胞样品和皮克级纯化dna的基因特征分析。
胚胎细胞（极体 卵裂 囊胚）——picoplex试剂（裂解扩增dna）——微阵列杂交——染色体变异分析
picoplex技术
picoplex使用非互补引物进行随机引物延伸，所得文库系统偏差高，而随机偏差极低。
引物特点：随机引物延伸和非互补引物
文库特征：高系统偏差 低随机偏差
*us patent 7,803,550 and ep1924704
picoplex® wga kit
植入前基因筛查（pgs）picoplex®单细胞扩增试剂盒
从单细胞中扩增dna构建高重复性的文库现在成为可能。picoplexwga kit采用技术，设计、优化用于从单细胞中扩增单拷贝基因组dna。起始量低至单细胞或6pg基因组dna。便捷的单管操作流程减少失误，节省时间并降低反应背景。
picoplex wga kit兼容微阵列比较基因组杂交（array cgh）分析及pcr平台，被试管婴儿行业供应商如bluegnome信赖并用于pgs/pgd。
操作流程
单管，三步。在1个pcr管或微孔中3个小时即可完成。无需样品纯化和转移过程，降低了样品损失，避免了操作污染和操作误差。
单细胞扩增再现性良好
肿瘤细胞经流式细胞术分选后，采用picoplex wga kit 扩增。每个细胞（蓝色曲线）扩增比率相同，并且预期产量相同。不含细胞的样品（绿色曲线；空白模板对照）显示非常低的背景。
适用cnv分析
cnv（拷贝数变异）分析：单个卵裂球样品采用picoplex wga kit扩増，标记后与bluegnome®24sure®arrays杂交（genesis genetics institute），结果清晰地显示了拷贝数变异。2011年eshre （欧洲人类生殖与胚胎学会）的临床实验证明了采用picoplex 技术进行人类染色体核型分析的准确性。
picoplex技术
技术优势：利用特殊随机引物（quasi-random primer）引发线性扩增进行全基因组扩增。
相比于以往的pcr、mda、malbc为基础的单细胞全基因组扩增技术，操作简单快速。扩增zui大优势：再现性良好。
picoplex技术：单细胞在单管或单孔中裂解。在预扩增过程中，特殊随机引物与基因组dna结合延伸，形成发夹结构文库，在接下来的扩增中，只有发夹结构的文库被扩增。
（中文版：单细胞 细胞裂解 模版dna 变性与回收模版 退火引物 引物延伸 变性与引物重连 延伸；茎环形文库收集 扩增
*步：细胞裂解；第二步：预扩增 采用特殊随机引物选择性结合基因组dna后进行扩增；第三步：扩增 使用含有illumina index的引物进行扩增）
应用
拷贝数变异分析-cnv（acgh）
单核苷酸多态性分型-snp
基因突变筛查-pcr
不能直接应用ngs，picoplex dna-seq kit可以直接应用ngs。
扩展产品
picoplex dna-seq (picoseq) 技术在picoplex wga技术的基础上发展，扩增部分与picoplex类似，但是在扩增的第二步，会加入illumina接头和index（条形码）。
订购信息
货号
产品名称
包装
rb3050/r30050
picoplex wga kit单细胞基因组扩增试剂盒，array cgh、pcr分析用
50次反应
rb3381/r300381
picoplex dna-seq kit，48种双端illumina indexes
48次反应
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文库特征：高系统偏差 低随机偏差
*us patent 7,803,550 and ep1924704
picoplex® wga kit
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picoplex wga kit兼容微阵列比较基因组杂交（array cgh）分析及pcr平台，被试管婴儿行业供应商如bluegnome信赖并用于pgs/pgd。
操作流程
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适用cnv分析
cnv（拷贝数变异）分析：单个卵裂球样品采用picoplex wga kit扩増，标记后与bluegnome®24sure®arrays杂交（genesis genetics institute），结果清晰地显示了拷贝数变异。2011年eshre （欧洲人类生殖与胚胎学会）的临床实验证明了采用picoplex 技术进行人类染色体核型分析的准确性。
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