进口反相色谱柱的选择性主要为疏水作用、立体选择性和氢键作用,还有一些二级作用,比如:离子交换、金属螯合作用等。我们来分析下反相色谱柱的表征参数:
一、usp数据库
1.疏水作用(hy):通过相同流动相体系,在不同的反相色谱柱对进行乙基苯测试,考察乙基苯的保留因子,保留因子越大,柱的疏水作用越强。
2.立体选择性(tfa):通过相同流动相体系,在不同的反相色谱柱对进行*测试,考察*的拖尾因子,由于*特殊的立体结构,拖尾因子越小,色谱柱的立体选择性越强,同时硅醇基作用较弱。
3.金属杂质含量(ctf):色谱柱中会残留少量的金属离子,一般金属离子会与喹啉结构发生螯合作用,导致峰拖尾,故喹啉拖尾因子越大,柱金属杂质含量越大。
4.氢键作用(cfa):*是碱性化合物,在酸性或中性条件下呈离子态,保留因子较小,保留主要依靠氢键作用,*保留因子越大,柱氢键作用越强。
二、pqri数据库
1.疏水作用(h):通过相同流动相体系,在不同的反相色谱柱对进行戊基苯和丁基苯测试,考察乙戊基苯和丁基苯的保留因子之比,比值越大,柱对不同碳链长度化合物的选择性越强,疏水作用越强。
2.立体选择(s):区分平面结构(三苯乙烯)和空间体积较大的结构(邻三苯基)的能力。前者与后者保留因子之比体现空间选择性,比值越大,立体选择越强。
3.氢键作用(a或b):通过相同流动相体系,在不同的反相色谱柱测试c8h10n4o2和c6h5oh保留因子比值,数值越大,氢键作用越强。pqri数据库进一步将氢键能力描述为氢键酸度(a)、非电离硅烷与碱相互作用的能力和氢键碱度(b)、硅胶表面或键合相与酸性分析物的特性进一步相互作用的能力。
4.离子交换作用(ph2.7或7.0):在流动相ph2.7和7.0下,分别测试苯苄胺和*保留因子之比,比值越大,说明色谱柱区分极性化合物的能力越强。
固定相类型:
a-a型硅胶,无定型硅胶,表面残余大量硅醇基;
b-b型硅胶,球形高纯硅胶,目前主流硅胶类型,硅醇基残留少;
e-键合相含嵌入极性基团的固定相;
phenyl-聚苯乙烯聚合物固定相;
f-氟代固定相。
对比usp与pqri的数据信息,pqri数据库的色谱柱参数更加全面反应色谱柱的性能。
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