ZsGreen和T-Sapphire绿色荧光蛋白
zsgreen和t-sapphire绿色荧光蛋白
天然绿色荧光蛋白产生荧光并且稳定，但激发光接近紫外线范围。由于紫外线需要特殊的光学考虑，并且会损坏活细胞，不适合用光学显微镜对活细胞成像。通过将改变65位单点突变引入残基（s65t），绿色荧光蛋白的大激发光很容易转移到488纳米（在青色区域）。这种突变是绿色荧光蛋白流行的变体，称为增强的gfp（egfp），可通过bd biosciences clontech提供的多种载体在市场上买到。此外，可以使用为荧光素设计的常用滤光片对增强版进行成像，并且该滤光片是当前可用荧光蛋白中亮的。使用egfp的缺点是对ph值敏感，并且二聚化趋势较弱。
gfp 或其变体的光谱特性在于构成发色团的结构通常是在第 65–67 位上，或着是靠近该位置的残基（例如，yfp）。除了关于发色团的主要突变以外，科学家还对其他基因位点定点诱变，以改善它们在异源性细胞系中的一些性能，包括蛋白的成熟和表达等其他因素。
sapphire是gfp突变体，它表现出大的斯托克斯位移(stokes shift)。接近发色团位置上的突变区域(t203i)使其激发峰和发射峰分别变成了399 nm 和511 nm。sapphire 表现出112 nm的斯托克斯位移。emerald 是另一种 gfp 修饰，其光稳定性和亮度都经过了改善，且它在哺乳类细胞中可以更高效地进行蛋白折叠。
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以上资料来自小编msq,2023.09.27
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