细胞胞内染色操作流程是什么？
你知道细胞胞内染色操作流程是什么吗？让我们一起来看看吧！
一、细胞计数
将培养好的细胞收集于15ml离心管并计数；500g离心4min，去上清。
二、制备单细胞悬液
将收集的细胞用1ml 0.5%bsa/pbs溶液重悬，400g离心3min，去上清，重复2次；用0.5%bsa/pbs溶液重悬细胞至浓度1x106个细胞/ml，分配到96孔板中，每孔100μl细胞悬液，400g离心5min去上清。
三、固定
每孔加入100μl细胞固定剂重悬细胞，2-8°孵育20min。
四、洗涤
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
每孔加入100μl细胞通透剂重悬细胞，室温孵育20min。
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
五、阻断fc受体
10-20min。
六、一抗孵育
每孔加入稀释后的一抗溶液100μl，2-8℃反应30min。
七、洗涤
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
八、二抗孵育
对于非荧光染料直标抗体，加入100μl荧光二抗重悬，避光2-8℃反应30min。对于直标抗体直接跳到步骤九。
九、洗涤
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
十、上机分析
用200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬细胞，4℃保存，上机分析。
更多有关细胞胞内染色的操作流程，请联系天津益元利康生物科技有限公司：
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三、固定
每孔加入100μl细胞固定剂重悬细胞，2-8°孵育20min。
四、洗涤
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
每孔加入100μl细胞通透剂重悬细胞，室温孵育20min。
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
五、阻断fc受体
10-20min。
六、一抗孵育
每孔加入稀释后的一抗溶液100μl，2-8℃反应30min。
七、洗涤
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八、二抗孵育
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九、洗涤
400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬，离心去上清，重复两遍。
十、上机分析
用200μl 0.5%bsa/pbs溶液重悬细胞，4℃保存，上机分析。
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