TransIT-X2转染试剂--低毒转染试剂产品介绍
transit-x2®dynamic delivery system
高效— —完-美的广谱转染试剂
实用性广— —可以适合用于dna质粒，sirna/mirna以及rnp复合物
科技— —非脂质体，阳离子聚合物递送
mirus x2转染系统通过创新的聚合物体系有效地将dna和rna从核内体递送到细胞质中，克服了核酸递送的关键障碍。
如需购买mirus转染试剂，请联系mirus授权全国代理--欣博盛生物
图1.transit-x2®dynamic delivery system可在多种细胞类型中实现较高水平的基因表达
transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）和lipofectamine®2000转染试剂（thermo fisher scientific）试剂与dna3:1将编码荧光素酶的质粒dna转染到41种不同的细胞类型中。使用标准荧光素酶测定法比较转染后24小时的荧光素素酶的表达。在优化比例下实验结果比较表明，使用transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）在41种细胞类型中的36种细胞中的荧光素酶表达优于或者等于竞争品牌；在17种细胞中transit-x2®dynamic delivery system是lipofectamine®2000表达水平的2倍，具体细胞在图中用‡表示。
图2.使用transit-x2®dynamic delivery system细胞中gfp表达水平较高
transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）将编码egfp的质粒dna转染到a549、cho-k1、hepg2、lncap、mdck、pc-12、原代人乳腺上皮细胞（hmec）和原代正常人真皮成纤维细胞（nhdf）。使用4-8μl transit-x2®（mirusbio）递送2μg dna。使用zeiss axiovert s100在转染后48小时拍照（32x）倒置荧光显微镜*代表原代细胞。
图3.使用transit-x2®dynamic delivery system在多个细胞系和原代细胞中的gfp转染效率较高
使用transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）将编码egfp的质粒dna转染到a549、cho-k1、hep g2、mdck、lncap、pc-12、原代人乳腺上皮细胞（hmec）和原代正常人真皮成纤维细胞（nhdf）中。使用0.2-0.4μltransit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）在96孔板中进行转染，以递送0.1μg dna（转染试剂：dna的比率2:1、3:1或4:1）。转染48小时后，用guava®easycyte™ 5ht流式细胞仪（milliporesigma）对三个孔进行分析。*代表原代细胞。
图4.使用transit-x2®dynamic delivery system转染质粒dna和sirna
使用transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）将cy®5标记的编码核yfp质粒dna和cy®3标记的sirna转染到hela细胞。使用4μltransit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）在6孔板中用聚-l-赖氨酸（pll）涂层的盖玻片进行转染，以递送2μg dna（2:1试剂：dna比）和25 nm sirna。使用alexa fluor®350 phalloidin（thermo fisher scientific）对肌动蛋白细胞骨架进行染色。在转染后24小时使用nikon a1r共焦显微镜拍摄图像（63x）。图像：黄色（核yfp）、蓝色（cy®5标记的dna）、红色（cy™3标记的sirna）、绿色（肌动蛋白细胞骨架）。
图5. transit-x2®dynamic delivery system比lipofectamine®2000具有更高的敲除率
transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）和lipofectamine®2000转染试剂（thermo fisher scientific）用于转染靶向内源性蛋白gapdh和aha1的sirna，或在原代正常人真皮成纤维细胞（nhdf）中递送非靶向对照。根据说明书，使用4μl transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）或6μl lipofectamine®2000（thermo fisher scientific）和25nm sirna在6孔板中转染细胞。使用qrt-pcr测定gapdh或aha1mrna相对于18s rrna水平的量，然后在转染后48小时缩放到阴性对照的mrna水平。误差条表示孔中的标准偏差。
图6.使用transit-x2®dynamic delivery system有效递送mirna可降低ptk9 mrna水平
transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）和lipofectamine®2000转染试剂（thermo fisher scientific）用于转染带有pre-mir™hsa-mir-1 mirna前体（thermo fisher scientific）或mirvana™ mirna模拟物（thermo fisher scientific）的t47d细胞™。mir-1两者都能降低ptk9 mrna水平。转染pre-mir阴性对照以评估基线mrna水平。根据每个制造商的方案，使用3μl transit-x2®（mirus bio）或lipofectamine®2000（thermo fisher scientific）和50 nm mirna在12孔板中转染细胞。使用qrt-pcr测量ptk9 mrna相对于18s rrna水平的量，然后在转染后48小时将其换算为阴性对照的mrna水平。误差条表示复孔的标准偏差。
用于
质粒dna和grna寡核苷酸转染
cas9蛋白和grna都可以由质粒dna编码用于转染。或者cas9可以像质粒dna一样被转染，grna可以作为rna寡核苷酸。
这些方法的优点包括：
●低成本-质粒dna是一种可再生、经济高效的格式
●灵活性-cas9和grna质粒适用于稳定或瞬时转染
●易于使用-grna寡核苷酸格式可将cas9简单地重新定位到不同的位点
图7.用cas9质粒dna和grna寡核苷酸进行高效基因组编辑
使用transit-x2®dynamic delivery system（24孔板的2µl/孔，mirus bio），用0.5µg编码pdna的cas9（millipore sigma）和50 nm ppib靶向两部分grna（dharmacon/ge healthcare）共转染hek 293t/17、u2os和nhdf细胞。t7e1错配检测法用于测定转染后48小时的切割效率。
cas9/grna核糖核蛋白（rnp）转染
纯化的cas9蛋白可与grna结合，形成rnp复合物，将其递送至细胞，用于快速高效的基因组编辑。
基于rnp的基因组编辑的好处
●高效转染-将cas9/grna复合物转染至多种细胞类型，包括难以转染的细胞，如免疫细胞和干细胞
●高特异性-预先形成的rnp复合物提供基因组编辑活动的快速脉冲
●无dna-无插入突变风险
图8. transit-x2®在rnp转染方面优于其他试剂
使用transit-x2®dynamic delivery system（1µl/孔，mirus bio）或lipofectamine®crisprmax™（1.5µl/孔和1µl/孔lipofectamine®cas9 plus™试剂，thermo fisher）或lipofectamine®rnaimax（1.5µl/孔，thermofisher）或lipofectamine™3000（1.5µl/孔和1µl/孔p3000™试剂，thermo fisher）将由靶向2部分grna（idt）的ppib（亲环蛋白b）和cas9蛋白（pna bio）组成的蛋白组成的核糖核蛋白（rnp）复合物递送到（a）hek 293t/17和（b）u2os细胞中。根据操作手册，采用24孔板，用6nm cas9蛋白（pna bio）测试不同水平的grna（6nm或12nm）。t7e1错配检测法用于测定转染后48小时的切割效率。
图9.用cas9和grna核糖核蛋白复合物在ips细胞中进行基因组编辑
transit-x2®dynamic delivery system用于在人诱导多能干细胞（ipsc）中转染cas9蛋白/grna核糖核蛋白（rnp）复合物。t7e1错配方法用于测定转染后48小时的切割效率。
供应商 产品编号 产品名称 中文产品名称 规格
mirusbio mir 6000 transit-x2®dynamic delivery system transit-x2®dynamic delivery system/适用于dna、sirna/mirna和crispr rnp的非脂质体高效低毒转染试剂 1.5ml
mirusbio mir 6003 transit-x2®dynamic delivery system transit-x2®dynamic delivery system/适用于dna、sirna/mirna和crispr rnp的非脂质体高效低毒转染试剂 0.3ml
mirusbio mir 6004 transit-x2®dynamic delivery system transit-x2®dynamic delivery system/适用于dna、sirna/mirna和crispr rnp的非脂质体高效低毒转染试剂 0.75ml
mirusbio mir 6005 transit-x2®dynamic delivery system transit-x2®dynamic delivery system/适用于dna、sirna/mirna和crispr rnp的非脂质体高效低毒转染试剂 5x1.5ml
mirusbio mir 6006 transit-x2®dynamic delivery system transit-x2®dynamic delivery system/适用于dna、sirna/mirna和crispr rnp的非脂质体高效低毒转染试剂 10x1.5ml
mirusbio mir 6010 transit-x2®dynamic delivery system transit-x2®dynamic delivery system/适用于dna、sirna/mirna和crispr rnp的非脂质体高效低毒转染试剂 0.1ml
更多产品信息，请联系mirusbio一级代理商--欣博盛生物
聚丙烯纤维生产厂家 价格合理
肿瘤生理学对喜树碱药物开发的影响
稀土纳米材料的应用及生产技术
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缺芯少电叠加原材料涨价，微型电动车或失去成本优势
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珠海到北京西城区货运公司,珠海到西城区的物流专线货运部
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实用性广— —可以适合用于dna质粒，sirna/mirna以及rnp复合物
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mirus x2转染系统通过创新的聚合物体系有效地将dna和rna从核内体递送到细胞质中，克服了核酸递送的关键障碍。
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图1.transit-x2®dynamic delivery system可在多种细胞类型中实现较高水平的基因表达
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图4.使用transit-x2®dynamic delivery system转染质粒dna和sirna
使用transit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）将cy®5标记的编码核yfp质粒dna和cy®3标记的sirna转染到hela细胞。使用4μltransit-x2®dynamic delivery system（mirus bio）在6孔板中用聚-l-赖氨酸（pll）涂层的盖玻片进行转染，以递送2μg dna（2:1试剂：dna比）和25 nm sirna。使用alexa fluor®350 phalloidin（thermo fisher scientific）对肌动蛋白细胞骨架进行染色。在转染后24小时使用nikon a1r共焦显微镜拍摄图像（63x）。图像：黄色（核yfp）、蓝色（cy®5标记的dna）、红色（cy™3标记的sirna）、绿色（肌动蛋白细胞骨架）。
图5. transit-x2®dynamic delivery system比lipofectamine®2000具有更高的敲除率
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图6.使用transit-x2®dynamic delivery system有效递送mirna可降低ptk9 mrna水平
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用于
质粒dna和grna寡核苷酸转染
cas9蛋白和grna都可以由质粒dna编码用于转染。或者cas9可以像质粒dna一样被转染，grna可以作为rna寡核苷酸。
这些方法的优点包括：
●低成本-质粒dna是一种可再生、经济高效的格式
●灵活性-cas9和grna质粒适用于稳定或瞬时转染
●易于使用-grna寡核苷酸格式可将cas9简单地重新定位到不同的位点
图7.用cas9质粒dna和grna寡核苷酸进行高效基因组编辑
使用transit-x2®dynamic delivery system（24孔板的2µl/孔，mirus bio），用0.5µg编码pdna的cas9（millipore sigma）和50 nm ppib靶向两部分grna（dharmacon/ge healthcare）共转染hek 293t/17、u2os和nhdf细胞。t7e1错配检测法用于测定转染后48小时的切割效率。
cas9/grna核糖核蛋白（rnp）转染
纯化的cas9蛋白可与grna结合，形成rnp复合物，将其递送至细胞，用于快速高效的基因组编辑。
基于rnp的基因组编辑的好处
●高效转染-将cas9/grna复合物转染至多种细胞类型，包括难以转染的细胞，如免疫细胞和干细胞
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图8. transit-x2®在rnp转染方面优于其他试剂
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图9.用cas9和grna核糖核蛋白复合物在ips细胞中进行基因组编辑
transit-x2®dynamic delivery system用于在人诱导多能干细胞（ipsc）中转染cas9蛋白/grna核糖核蛋白（rnp）复合物。t7e1错配方法用于测定转染后48小时的切割效率。
供应商 产品编号 产品名称 中文产品名称 规格
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